增效混剂对神经细胞钠通道的抑制作用研究.pdfVIP

主里些三兰叁奎垫主些墨墨盒兰±旦笙叁堡奎叁 一75 增效混剂对神经细胞钠通道的抑制作用+ 高永闯郭朕群刘安西 韩嘉祥 (南开大学生物系．天津300071)(南开大学元素有机化学研究所，天津300071) 摘要：应用膜片钳技术，以MN一9D神经细胞为材料研究了溴氰菊酯及辛硫磷混剂的增效机理。膜片钳实验 Na+电流抑 表明10smol／L辛硫磷对Hal通道电流抑制作用很小，并随作用时间延长而逐步恢复。加药lmin 抑制中时为40rain，比单剂提高两个数量级，因此混剂可增强对Na+通道电流抑制作用。通过Na‘电流的抑制 数据、尾电流衰减时间常数分析表明溴氰菊酯的修饰作用主要集中在关闭和静止状态的Na+通道，减缓通道 的打开，延长通道的关闭和失活状态。 关键词：澳氰菊醋．辛硫磷．Na+通道，增效混剂 辛硫磷是有机磷农药中高效低毒的品种。它与多种拟除虫菊酯混配均有增效作用。如： 辛硫磷与氰戊菊酯混配对抗性棉铃虫增效明显，辛硫磷与溴氟菊酯混配可延缓家蝇抗性的 产生等。拟除虫菊酯按照结构和中毒症状可分为I型和II型两类化合物。在混剂中，II型 菊酯与辛硫磷混配相对常用，占比例较大，因此研究它们的增效机理具有普遍意义。神经膜 电压门控钠通道是II型菊酯的主要靶标，它是由大分子跨膜蛋白形成的亲水孔道，是Na+内流 clⅢap 产生生物电的分子基础，也是许多神经毒素的作用靶标。本文用膜片钳技术(patch recording 道的作用，从细胞电生理角度探讨混剂的增效机理，为杀虫剂合理混用、复配提供理论依据， 为抗性治理(IRM)及害虫综合防治(IPM)提供线索。 1．材料及方法 1．1实验材料 americana 1 L．)为室内人工饲养的种群。饲养条 1．1实验昆虫：美洲大蠊(Periplaneta 件12小时光照，12小时黑暗，以人工配制的鼠料喂养，饲养温度27±2℃，相对湿度70％。 1 交而成，是一种多巴胺神经细胞系，在细胞特性上与中枢DA神经元相似。 1．2杀虫知及试剂 i 2．1辛硫磷(phoxim)纯度87％，南开大学元素所提供。 溴氰菊酯(deltamethrin)纯品，南开大学元素所提供。 甘黠醇溶液(mannit01)纯品，上海化学试剂总厂。 河豚毒素(rrx)配成10nmol／L溶液，阻抑钠通道电流。 1 22美州大蠊生理溶液(mmol／L)：NaCI208．6，KCI 5．4， 用 3．I，CaClzNaHCO．}2．0， NaOH调pH7．0。 i．2．3膜片钳溶液：为了消除K+通道电流的影响，在电极内液中加入Cs+离子。 5 (1)电极内液(mmol／L)：CsCl100，MgCI0，EGTA10，ATP2，cAMP0．25，EPEs40， 2 用CsoH调pH7．3。 丝 ±里些三兰垒查垫童些重星：叁墨±旦兰垒堡奎墨—— 10，HEPEs 1，MgCI1，D-glucose 5．4，CaCl2 2 (2)胞外液(mmol／L)：NaCl150，CsCl2 7 3。 10，CsOlI调DH 1．3实验方法； l_3．1美州大蠊中枢神经动作电位(AP)的汜录： 用甘露醇间隙法胞外记录A