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谷氨酸温度敏感突变株CNl021
生产规模发酵条件的研究
张克旭陈宁
(天津科技大学生物工程系天津300222)
王东洋
(山东菱花集团公司 济宁272173)
采用温度敏感型菌株强制发酵谷氨酸,不需要控制生物素亚适量,仅需通过
物理方式(变换温度)就可完成谷氨酸生产菌由生长型细胞向产酸型细胞的转
变,从而避免了因原料的影响而造成产酸不稳定的现象,发酵稳定且粗放,发酵
周期短,设备利用率高。另外,由于在采用温度敏感型菌株强制发酵过程中不存
在生物素亚适量问题,生物素可以大过量,从而可强化体内C02固定反应,提高
谷氨酸对糖的转化率,达到高产酸、高转化率的目的。本文对谷氨酸温度敏感突
变株CNl021的6m3发酵罐规模的发酵条件进行了详细研究,确立了最佳工艺参
数,为温度敏感突变株CNl021在味精行业推广应用奠定了基础o
1 材料与方法 ,
1.1菌种
谷氨酸温度敏感突变株CNl021。
1.2培养基(g/L)
1.2.1活化斜面培养基 ,
葡萄糖1,蛋白胨10,牛肉膏10,酵母膏5,NaCI
2.5,琼脂20,pH7.0~7.20.75ke/
c矗20min ‘
1.2.2斜面保藏培养基
蛋白胨10,牛肉膏10,酵母膏.5,NaCl O.75kg/em2
2.5,琼脂20,pH7.0—7.2
‘
20rain
1.3一级种子培养
取新鲜活化斜面菌种2支,各用10mL无菌肉汤全部洗下,转接于装有
1200mL种子培养基的5000mL三角瓶中,30℃,80础分,振荡培养13ho
1.4二级种子培养
·37·
种子罐中,30。C,240r/rain通气培养26ho
1.5谷氨酸发酵
发酵罐中,33℃一37℃一38℃,220r/min发酵32ho
2 结果与讨论
2.1一级种子培养条件的确定
2.1.1一级种子培养液终pH值的影响
研究了一级种子培养液不同终pH值对二级种子生长的影响,其对二级种子
生长的影响如图l所示。
1.O
0.8
燃
0.6
米
督
0.4
O.2
0.0
6.4 6.8 7.0 7.2 7.5 7.8 8.O
…级种子培养液终pH值
图l一级种子培养液终pH值对二级种子生长的影响
在7.0,pH值过低或过高均不利于二级种子生长及发酵高产酸。
2.1.2一级种子培养基最佳装液量的确定
况下对一级种子生长的影响,结果如图2所示。
1.2
1.0
憾O·8
装o.6
擎0.4
0.2
O.0
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