四倍体皇家嘎啦苹果的培育及其生物学特性研讨.pdf

砂2002 栽培的面积还不够大，设施条件较为简陋，抵御自然灾害的能力还较为脆弱。从目前的实际情况来看， 应以发展投资较少、操作简便的简易设施为主，例如小拱棚薄膜扭盖、地膜扭盖和凉爽纱扭盖等，同 时，也应加强投资稍大，但经济效益更好的较为简单的塑料大栩硬盖的简易无土栽培设施，对于造价昂 贵、运行成本高的大型温室的建造需慎重。 第一作者简介 刘士哲，男，1964年4月生，1987年毕业华南农业大学土坡农化系，硕士，现任 华南农业大学资源环境学院副院长，副教授，植物抗性生理在职博士，主要从事工厂化农业方面的教 学、科研和生产推广工作，主持和参加了广东省和国家科技部多项研究，出版教材和专著各一部，论文 30多篇。联系地址:广州市天河区五山华南农业大学资源环境学院，邮编:510642，电话:020- E-mail:szliu@scau.edu.cno 四倍体 “皇家嘎啦”苹果的培育及其生物学特性研究 刘庆忠，赵红军1刘 鹅tMongRengong2FreddiHammerschlag3 (I山东省果树研究所，秦安 271000;2USDA/ARSHCRL,Corvallis,OR97330,USA; 3USDA/ARS,FruitLaboratory,Beltsville,MD20705,USA) 摘 要 采用 “立家嘎啦”苹果 (MalusdomesticaBorkh)离体新梢叶片作为外植体，研 究了不同浓度的秋水仙紊长时间处理 (5d)诱导eB倍体的效率。结果表明，以不定芽再生培养 基附加25mg几秋水仙紊效果录好，最高在36.7%的叶片外植体上获得了e4倍体植株。高浓 度 (75--200mg几)秋水仙素处理严重抑制组织的再生。采用流式细胞技术刹定出诱变植林的 细胞核DNA含黄比对照高出一倍，确定了植林为四倍体。四倍体植株不仅在遗传上而且在解 别形态及生理特性上也明显区别于二倍体。四倍体植株已移栽于大田，并进行了球接育苗和大 树高接。 关.，秋水仙素离体叶片 ，〔家，哟苹果四倍体生物学特性 X “嘎啦”苹果品种由新西兰育成，由于其品质上乘、风味怡人、成熟期正值晚夏水果淡季而倍受人 们的欢迎，现已成为世界上最重要的苹果品种。但该品种最大的缺点是果个小，生长势强旺，易感火疫 病、白粉病等病害，这对其大规模的商业化发展也有一定的影响。由于苹果童期长、自交不亲合和染色 体组的高度杂合，杂交育种需时太长，同时也伴随出现不利的性状，因此采用常规杂交手段对其定向改 良是不可能的。本项研究采用生物技术染色体组加倍手段克服了上述不足，成功地从叶片外植体上再生 出 “皇家嘎啦”苹果的同质四倍体。 材料与方法 1.1材料 皇“家嘎啦”(RoyalGala)苹果离体生长的新梢保存在增殖培养基上，每隔4周取lcm新 梢作为外植体转移 1次。增殖培养基由MS无机盐添加 100mg/L肌醇、0.5mg/L盐酸硫胺素、 1.Omg/L6-节基嘎岭、O.lmg/L叫噪丁酸、0.5mg/L赤娜素、30g/L蔗精和7g/L琼脂，州为5.60培 A1.244 中国青年农业科学学术年报。 养室温度为25C，光照强度2000Ix，光周期为16h光照，8h黑暗。 1.2 秋水仙帝处理，多倍体新梢的获得 外植体取自离体新梢顶部1--2节的成熟展开叶片，首先切除 叶柄和叶尖，然后沿中脉处横切两刀造成中部两个伤口，随即放人含有0-200mg几秋水仙素的液体再 生培养基中培养，每处理30个外植体。不定梢再生培养基的成分是N6大量元素、LS微量元素、 100mg/L肌醇、0.5mg/L盐酸硫胺素、2mg/LTDZ,300mg/L水解酪蛋白、3%蔗搪，pH5.4a 叶片外植体在含秋水仙素的液体再生培养基中培养5d后取出，用无菌水冲洗两遍，然后转移到不 含秋水仙素、其他成分相同的固定再生培养基上继续进行不定芽诱导，6周后将获得的不定芽芽丛进一 步分割.然后转移到新梢增殖培养基上进行继代培养。在此期间根据目测将有形态变异的新梢单独取出 进行增殖。 1.3倍性鉴定 将10mg离体新梢叶片在0.5ml的PartecHR-A溶液 (分离细胞核的柠檬酸缓冲液)中 研磨。将样品通过m031 PartecCelltricsTM微孔膜过滤