DHHCs家族成员在小鼠CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋调节性T细胞活化中的表达及意义研究.pdf

第35卷 第5期 2012年 10月 遵 义 医 学 院 学 报 VO1．35 NO．5 ACTA ACADEM IAE M EDICINAE ZUNYI oct．2012 · 基础医学研究 · DHHCs家族 成 员在 小 鼠 CD4+CD25一T细胞 和 CD4+ CD25+调节性 T细胞活化中的表达及意义 秦安东 ，李 颖 ，罗军敏 ，李永菊 ，徐 林 (1．遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地，贵州 遵义 563099；2．江苏省淮安市第四 人民医院 医学检验 中心，江苏淮安 223000) [摘 要]目的 观察 DHHCs家族成员在小鼠CD4 CD25一T细胞和CIM CD25 调节性 T细胞活化前后的表达 情况并探讨其意义。方法 磁珠法从小鼠脾脏分选CD4CD25一T细胞和CD4 CD25调节性T细胞 ，流式细胞术 检测纯度后 ，体外用anti—CD3e／CD28抗体分别刺激其活化。TRIzol法提取细胞总RNA，RT—PCR逆转录成 cD— NA，分别用 24个DHItCs家族成员特异性引物进行 PCR反应，对产物进行琼脂糖凝胶 电泳分析。结果 活化前 CD4 CD25一T细胞高表达 DHHC5、DHHC14和 DHHC18，活化后其上调表达 DHHC2、DHHC4、DHHC6、DHHC8、 DHHC9、DHHC12、DHHC15和DHHC16；活化前CIM CD25 调节性T细胞仅表达DHHC9，活化后其上调表达DH— HC18，而下调DHHC9的表达。结论 DHHCs家族成员在 CD4 CD25一T细胞和 CD4 CD25 调节性T细胞中表达 存在差异，活化后表达谱发生显著变化，提示DHHCs家族成员的表达与CD4T细胞的活化有关，可能参与 CD4 T细胞不同亚群活化的调控。 [关键词]DHHCs；蛋白质酰基转移酶；蛋白质棕榈酰化；细胞活化 [中图法分类号]R392．1 [文献标识码]A [文章编号]1000—2715(2012)05—0359-08 Theexpression 0fDHHCsfamily membersin murineactivated CD4 CD25一T cellsandactivatedCD4 CD25 regulatoryT cells Qinandong ，Liying，Luo m ，Liyongiu， Z (1．DepartmentofImmunologyandImmunologyInnovationBaseofPostgraduateEducationofGuizhou Province，ZunyiMedicalCollege，GuizhouZunyi563099，China：2．MedicalExaminationCentre．the 4thPeoplegHospitalofHuaihn，JiangsuHuaihn223000．China) lAbstractlobjectiveTodetecttheexpressionofDHHCsfamilymembersinmurineactivatedCD4 CD25一TcellsandCD4 CD25 regulatoryTcellsandfurtherexplorethesignificance．MethodsCD4 CD25 regulatoryTcells(Tregs)andCD4 CD25一TcellswerepurifiedbyMagneticactivatedcell sorter(MACS)from murinesplenocytesand identifiedbyflow cytometry．TregsandCD4 CD25一T cellswerestimulatedbyanti—CD3eandCD28antibodiesinthepresenceofrecombinantinterleukin一 2，respectively．TotalRNA ofactivated cel