紫花地丁的抗菌化学成分研究.docVIP

精品论文 参考文献 紫花地丁的抗菌化学成分研究 刘振志 翟慧媛（南京市中西医结合医院 药剂科 江苏南京 210014） 【摘要】目的 研究紫花地丁(Viola yedoensis Makino)的化学成分及其抗菌活性。方法　综合运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等方法进行分离纯化；采用NMR鉴定化合物结构；肉汤稀释法评价各化合物的抗菌活性。结果　从紫花地丁的乙酸乙酯层分离得到4个化合物，分别为芹菜素（1）、木犀草素（2）、阿魏酸（3）、beta;-谷甾醇（4），其中化合物2、3对大肠杆菌的MIC分别为：0.0625mg/ml、0.125 mg/ml。结论　化合物3为首次从该植物中分离得到，且化合物1～3均有较强的抗菌活性。 【关键词】紫花地丁 化学成分 抗菌活性 【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）26-0229-01 紫花地丁(Viola yedoensis Makino)是堇菜科（Violeceae）堇菜属（Viola L.）多年生草本植物紫花地丁的带根全草[1]。其味微苦、辛, 性寒、入心、肝经,具有清热解毒、凉血消肿、清肠止泻的功效。紫花地丁为临床常用中药，用于治疗痢疾、乳房炎、黄疸、咽炎等症[2]。以紫花地丁为主药的方剂也广泛应用于临床，常与金银花、蒲公英等配合组方，如我院院内制剂消炎散核冲剂[3]，用于淋巴炎、扁桃体炎等，疗效确切。化学研究表明，紫花地丁中含有挥发油、黄酮、苷类、有机酸等多种结构类型的化合物，其中有机酸和黄酮类为其主要的抗菌有效成分[4],但目前关于具有抗菌活性的单体成分的研究报道较少。本文旨在研究紫花地丁中具有抗菌活性的化学成分，为其临床应用和质量控制提供依据。 1 仪器与材料 核磁共振仪: Bruker AV 400 instrument (TMS内标)；液质联用色谱仪：Alliance 2695, Quattro Micro TM ESI (Waters)；柱色谱和薄层色谱用硅胶均系青岛海洋化工厂生产；氘代试剂（ALDRICH公司生产）；营养肉汤培养基（批号110406）购于北京三药科技开发公司。 紫花地丁药材干燥全草购于南京药业股份有限公司。实验所采用的菌株均来自于南京市中西医结合医院临床收集标本。 2 提取与分离 紫花地丁干燥全草约6 kg， 95%乙醇加热回流提取3次，每次6h，提取液减压浓缩得浸膏550g，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得石油醚层46g、乙酸乙酯层97g、正丁醇层190g。 取乙酸乙酯层提取物97g，常压硅胶柱层析，以石油醚-醋酸乙酯、醋酸乙酯-甲醇和甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱得到15个组分。经重结晶、PTLC、反复硅胶柱色谱等方法进一步细分，分别得到化合物 1（11.3mg）、2（10.3mg）、3（9.7mg）、4（37.1mg）。 3 结构鉴定 化合物 1:黄色油状物，ESI-MSm/z:271[M-H]-。H-NMR(300 MHz,CD3OD)H:7.31(2H,d,J=8.6Hz),6.82(2H,d,J=8.6Hz),5.89(1H,d,J=1.5Hz),5.34(1H,dd,J=2.9,12.9Hz),3.11(1H,dd,J=12.9 ,17.1Hz) ,5.69(1H,dd,J=2.9,17.1Hz)。13C-NMR(100MHz ,CD3OD)C:80.6(C-2),44.1(C-3),197.9(C-4),165.5(C-5) ,96.3(C-6 ,8),168.5(C-7),164.9(C-9),103.4(C-10),129.9(C-1rsquo;),129.1(C-2rsquo;,6rsquo;),116.4(C-3rsquo;,5rsquo;),159.1(C-4rsquo;)。以上数据与文献[5]报道一致，鉴定为芹菜素。 化合物 2:黄色粉末，ESI-MSm/z287[M+H]+。1H-NMR（CD3OD）H6.20(1H,d,J=2.0Hz,H-6),6.44(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6.54(1H,s,H-3),6.89(1H,d,J=8.9Hz,H-5rsquo;),7.37-7.40(2H, m,H-2rsquo;,6rsquo;)。13C-NMR（CD3OD）C166.2(C-2),104.0(C-3),184.0(C-4),159.5(C-5),100.3(C-6),166.5(