HPLC法测定妇康颗粒中绿原酸的含量研究.pdfVIP

HPLC 法测定妇康颗粒中绿原酸的含量 刘善新 贾元印 张新军 梁瑞雪 刘 青 山东省中医药研究院 济南 250014 摘 要 本文采用 HPLC 法测定了妇康颗粒中绿原酸的含量 通过方法学的系统考察 发现本 法准确 灵敏 专属性强 重现性好 平均加样回收率为 98.2% RSD 为 1.31% 为 控制该制剂内在质量较理想的方法 关健词 妇康颗粒 绿原酸 HPLC 法 含量测定 妇康颗粒为本课题组研制的中药六类新药 具有活血化瘀 清热解毒的作用 金银花是本方 的君药 其所含绿原酸是该药物的主要有效成分 为探讨本制剂的内在质量 制定该药物的定量 质控标准 参考文献中绿原酸的含测方法[1-4] 对样品中的绿原酸进行了含量测定方法的研究 通 过方法学的系统考察和三批样品的含量测定 建立了本品中绿原酸的高效液相色谱含测方法 现 报告如下 1 仪器与试药 高效液相色谱仪 美国 water 公司 600 检测器为 waters996 二级管陈列检 32 测器 泵 waters 600 控制器为 waters600 数据处理器为 waters M 工作站 色谱柱为日本岛 津公司 shim-packclc-ODS,0.18m 6.0 超纯水 Millipore 公司纯水器 所用甲醇为色谱纯 其它试剂均为分析纯 绿原酸对照品购于中国药品生物制品检定所 供含量测定用 批号为 0753-200111 2 样品溶液的制备 2.1 提取溶剂的选择 取同批样品 4 份 精密称定 各加硅藻土 2g 拌匀 其中两份各加甲 醇 50ml 另两份各加 80%甲醇 甲醇:水=80:20 下同 50ml 称定重量 超声提取 30min 称重 用相应溶媒补足损失的重量 摇匀 再取续滤液 10ml 置 25ml 棕色量瓶中 用相应溶媒稀释至 刻度 摇匀 作为供试品溶液 准确吸取上述 4 份样品液各 10µl 注入高效液相色谱仪 分别测 定各样品的峰面积积分值 并计算各份样品中绿原酸的含量 结果表明以 80%甲醇提取的 2 份样 品 其绿原酸的提取量明显高于以甲醇提取者 见表 1 故在超声提取时 确定采用 80%甲醇进行 提取 表 1 不同溶剂对绿原酸提取效果的影响 样 品 80%甲醇 甲 醇 含 量(mg/g) 2.65 2.16 1 2.2 超声提取时间的确定 取同批样品 3 份 每份约 2.0g 精密称定 加入硅藻土 2g 拌匀 置具塞三角瓶中 加 80%甲醇 50ml 称定重量 分别超声 25 30 35min 称重 用 80%甲醇补足 损失的重量 摇匀 取续滤液 10ml 置 25ml 棕色量瓶中 用 80%甲醇稀释至刻度 摇匀 作为供 试品溶液 准确吸取上述三份供试品溶液各 10µl 注入高效液相色谱仪 分别测定峰面积积分值 结果表明 超声提取 25min 者 积分值偏低 30min 和 35min 的积分值基本一致 这表明超声 30min 即可提取完全 见表 2 故本含测超声提取时间确定为 30min 表 2 不同超声时间绿原酸的峰面积积分值