肠杆菌科细菌鉴定总结.docVIP

精品论文 参考文献 肠杆菌科细菌鉴定总结 林丹珠 (广东省蕉岭县人民医院检验科　514100) 【摘要】近年以来参加省微生物室间质评活动。其中鉴定肠杆菌科菌48株，准确率较高，为进一步提高鉴定技术，对鉴定过程各环节进行了探讨。 【关键词】细菌鉴定 肠杆菌科 【中图分类号】R378.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2012）03-0353-02 肠杆菌科细菌是临床标本中最常见的细菌之一。因而，提高肠杆菌科细菌鉴定准确率，具有重要意义。我们于1995年起参加省微生物质室间评活动，现将在该活动中对其中肠杆菌科细菌的鉴定作一小结，与同道共同讨论。 一、材料与方法 (一)材料 1.菌株：近年以来省临床检验中心发放的肠杆菌科细菌48株。 2.培养基：主要为浙江省军区后勤部卫生防疫检验所生产的微量生化鉴定管，部分培养基如O/F、K IA、半固体、葡萄糖蛋白胨水等用干燥培养基制备。 3.诊断血清：沙门菌属、志贺菌属、致病性大肠杆菌等诊断血清均购自卫生部兰州生物制品研究所。 (二)方法 1.根据Ｇ-杆菌、O/F(F)、氧化酶(＋)，确认被检菌为肠杆菌科细菌。 2.参考《全国临床检验操作规程》(下简称《规程》)第一版中肠杆菌科菌的生化特性，做苯丙氨酸、葡萄糖酸盐、葡萄糖产气、硫化氢、靛基质、甲基红、枸橼酸盐、动力、尿素、赖氨酸、鸟氨酸、乳糖、棉子糖、山梨醇、侧金花醇、木糖、丙二酸盐等17项生化反应试验。 3.根据上述试验的结果及菌落特征，按照《规程》肠杆菌科有关属、种鉴别表对被检菌作出初步判定。 4.将初步鉴定的结果与《规程》第一版的描述作对照，如完全符合，方作出种或属的最后鉴定；如不完全符合，则参考其它文献后再作判定。 5.如上述的鉴定结果为沙门菌、志贺菌或粪便中的大肠埃希菌，则再选用相应抗血清鉴定其血清型别。 二、结果 鉴定结果见附表。从表中可看到菌种鉴定范围较广，共13个属31个种。鉴定正确率为100％。 三、讨论 1.参考资料要足够。除《规程》(包括第一、二、三版)外，至少应备有《诊断细菌学》(李仲兴等主编)等文献。我们认为，《规程》第一版某些内容较为简明扼要(如表5-3-16)，对于上述各菌的鉴定，有时比该书的第二、三版更为实用。因此，《规程》第一版仍应作为必备的参考书之一。附表 48株肠杆菌科菌的鉴定结果 2.备有一定数量的标准菌株，以便对实验材料进行质量测。 3.选择合适的培养基。我们认为，浙江省军区后勤部卫生防疫检验所生产的微量管绝大多数质量是较好的，可选用。 4.选择适当的鉴定方法(见上述)。我们在鉴定过程中发现，如用编码法进行鉴定，效果则不甚理想。例如，用GYZ-15e编码系统(第一代)鉴定，有7个种的细菌被错误鉴定；即使用第二代GYZ-15e，仍有三个种被错误鉴定 5.正确判定结果。下述结果判定须慎重。 (1)动力：用微量管法观察动力不理想，宜用常规试管法。此外， 必要时置25℃培养或再结合镜检作出判定。 (2)枸橼酸盐、丙二酸盐：24h后培养液颜色稍加深，通常可判为(＋)，并继续培养证实。 (3)尿素：24h出现可疑结果时，须继续培养。如48h 后颜色变深，判为(＋)，否则判为(－)。 (4)甲基红：隔天读取结果时，勿轻易判为(＋)。必要时，宜取2-4日培养物作试验。 6.对疑难菌株的鉴定，首先要确证每项试验是否正确无误，必要时重复做一次，然后再参考多种文献进行综合分析判定。