生化检验基本知识-2.pptVIP

2、回收试验 目的：是检测比例误差，以衡量分析方法的准确度。 方法： 是在样品中加入一定量被测物质，然后用同样方法测定，测得值与理论值之比乘以100%即为回收率，合格的回收率应为100%±5 %。 计算： 回收浓度＝分析标本测得浓度－基础标本测得浓度 加入浓度＝ ×标准液浓度 标准液量（ml） 病人样品量＋标准液量（ml） 回收率（%）＝ ×100 回收浓度 加入浓度 注意事项： （1）吸量要准确。所用吸管应校正并按正规要求操作。 （2）加入标准液后的浓度应达到医学决定水平，同时应在该方法的线性范围内。 （3）加入标准液的体积应在总体积的10%以内。 （4）一般应做高、中、低不同浓度标准液的回收试验，计算平均回收率。 （5）为了减少随机误差对检测比例误差的干扰，最好能重复测定2～3次。 举例 某法测定血糖回收率的标本制备和测定结果如下： （1）样本制备： ①基础样本： 血清2ml＋蒸馏水0.1ml ②分析样本1：血清2ml＋25mmol/L葡萄糖标准液0.1ml。 ③分析样本2：血清2ml＋100mmol/L葡萄糖标准液0.1ml。 （2）按操作要求测定上述样本，将结果填入下表 血糖回收试验结果 测定浓度 加入浓度 回收浓度 回收率% 基础样本 5.50 － － － 分析样本1 6.75 1.19 1.25 105.0 分析样本2 10.20 4.76 4.70 99.4 回收率的理想值为100%，现在的平均回收率为102.2%，比例误差为2.2%，表明当一个标本的葡萄糖浓度为5.5mmol/L时，用该法测定值为5.62mmol/L，误差为0.12mmol/L（5.5mmol/L×2.2%）。 一般要求回收率在95％～105％之间。 平均回收率＝ ×100%＝102.2% 105＋99.4 2 3、干扰试验 目的：是检测恒定误差，以衡量方法的特异性和准确度。干扰物与分析试剂反应是特异性差，若不与试剂反应却影响测定值是干扰（准确度差）。 方法： 选混合血清标本，分成两份，其中一份标本中加入疑有干扰作用的物质。用候选方法对未加干扰物和加入干扰物的两种标本同时测定，两者之差即表示该干扰物产生的干扰所引起的误差，即干扰值。 干扰值＝分析标本测得值－基础标本测得值 注意事项： （1）被试验的物质 根据方法的原理，提出可能的干扰物。一般应考虑的因素是胆红素、溶血、脂血、抗凝剂等。 （2）可疑干扰物的浓度 加入可疑干扰物的浓度须达到有价值的范围，有可能应达到病理标本的最高浓度值，在确证有影响后，应测定在何浓度时所产生的误差在临床上无意义（最低干扰浓度）。 （3）本试验检测的误差包括方法特异性不高和干扰物的作用所引起的误差。 举例 尿酸对GOD-POD法测定血糖的干扰： （1）样本制备： ①基础样本： 血清0.9ml＋蒸馏水0.1ml ②分析样本1：血清0.9ml＋4mmol/L尿酸标准液0.1ml。 ③分析样本2：血清0.9ml＋8mmol/L尿酸标准液0.1ml。 （2）用GOD-POD法测定上述样本，将结果填入下表 干扰实验检测结果（mmol/L） 葡萄糖测得值 加入尿酸值 干扰值 基础样本 6.50 － － 分析样本1 6.20 0.40 0.30 分析样本2 5.95 0.80 0.55 单位浓度尿酸使葡萄糖减少值＝ 干扰值1＋干扰值2 加入尿酸值1＋加入尿酸值2 0.30＋0.55 0.40＋0.80 ＝ ＝0.7mmol/L 测定表明血清尿酸0.4mmol/L时，可使血糖测定结果约减少0.28mmol/L（0.4×0.7）。 消除干扰的常用方法： （1）作试剂空白和标本空白试验。 （2）采用物理、化学方法分离去除干扰物质。 （3）采用双波长或多波长检测方法排除干扰。 4、方法对比实验 目的： 对比实验可检测方法的系统误差，经统计分析后可提供系统误差的性质，属比例误差还是恒定误差。 方法：对一组病人的样品同时用候选方法与参考方法测定，并统计量组结果有无显著性差异。（统计方法、配对t检验、直线回归）一般P＜0.01者，该候选方法不能采用， 注意事项： （1）试验样品数 一般做40～100例。最好要包括各种疾病的标本，即包括在常规工作中可能遇到的整个分析范围。 （2）重复分析