第14章 物质代谢调控-121212.ppt

反义RNA调控：反义RNA可与目的基因的5互补配对，配对的区域通常也包括启动子的Shine-Dalgarno序列，使mRNA不能与核糖体有效结合，从而阻止蛋白质的合成。 反义RNA基因已被导入真核细胞，控制真核生物基因表达。例如，将乙烯形成酶基因的反义RNA导入蕃茄，大大延长了蕃茄常温贮藏期。 作业题 原核生物中共阻遏物和诱导物如何对基因表达起调控作用。 1）高等真核生物的基因组远比细菌的基因组大得多 2）很多重复序列与调控作用有关 3）染色质结构的变化可以调控基因表达 4）存在同一染色体上不同基因间的调控，也存在不同染色体之间的基因调控 调控发生在DNA水平，转录水平，转录后修饰，翻译水平和翻译后修饰等多种层次。多数基因表达调控发生在转录水平 二、真核生物的基因调控 一、DNA的改变 （1）基因剂量与基因扩增 组蛋白基因是基因剂量效应的一个典型例子。为了合成大量组蛋白用于形成染色质，多数细胞含有数百个组蛋白基因拷贝 基因剂量可经基因扩增临时增加。人类癌细胞中的许多致癌基因，经大量扩增后高效表达，导致细胞生长失控。有些致癌基因扩增的速度与病症的发展及癌细胞扩散程度高度相关。 （2）DNA重排 真核生物基因组中的DNA序列可发生重排，这种重排是由特定基因组的遗传信息所决定的，是有些基因调控的重要机制。 动物抗体基因重排 一个抗体分子包括两条重链( H )和两条轻 ( L ) 氨基端( N )是变异区( V )，羧基端( C )是恒定区( C ) （3）DNA甲基化 真核生物中，少数胞嘧啶第5碳上的氢被一个甲基取代（甲基化）。甲基化C在DNA复制中可整合到正常DNA序列中。C甲基化在CG双核苷酸序列中发生频率最高。许多真核 生物基因5端 未翻译区富含 CG序列，易甲 基化。甲基化 可降低转录效率。 二、转录水平的调控 (1)顺式调控元件（Cis-acting element） 指基因转录起点上游与基因表达调节有关的特异序列 真核生物基因(A) 在5?端启动子的顺式调控元件 原核生物基因(B)在5?端启动子的顺式调控元件 转录方向用箭头表示，转录起始点用+1表示 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 转录起始 真核生物启动子保守序列 强化子（增强子） 转录强化子是真核生物基因转录中的另一种顺式调控元件，通常位于启动子上游700-1000bp处，离转录起始点较远 ①与转录激活子结合，改变染色质的构型 ②使DNA弯曲形成环状结构，使强化子与启动子直接接触，以便通用转录因子、转录激活子、RNA聚合酶一起形成转录复合体，从而提高mRNA合成效率 强化子主要有两个功能: DNA环化与转录活性 强化子竞争控制基因表达 激活子 激活子是一种与强化子结合的蛋白质，也属于一种转录因子 正激活子 真激活子 （促进转录） 抗阻遏物激活子 激活子 负激活子：抑制转录 乳糖操纵元的正调控 除了阻遏蛋白能抑制lac操纵元转录外，其它因子也能有效地抑制lac mRNA转录，这个因子的活性与Glc有关： Glc抑制腺苷酸环化酶的活性 →腺苷酸环化酶催化ATP→cAMP→cAMP+代谢激活蛋白(CAP)→cAMP-CAP复合物，作为操纵元的正调控因子 →当cAMP-CAP复合物的二聚体插入到lac启动子区域特异核苷酸序列时，使启动子DNA弯曲形成新的构象，RNA聚合酶与这种 DNA 新构象的结合更加牢固，因而转录效率更高。 →在有Glc存在时，不能形成cAMP，也就没有操纵元的正调控因子cAMP-CAP复合物，因此基因不表达。 乳糖操纵元的正调控 R LacZ LacY LacA mRNA mRNAZ mRNAY mRNAA 基 因 表达 CAP基因 结构基因 T CAP O CAP结合部位 RNA 聚合酶 T cAMP - CAP P 葡萄糖 分解代谢产物 腺苷酸环化酶 磷酸二酯酶 ATP cAMP 5-AMP 抑制 激活 葡萄糖降解物与cAMP的关系 cAMP CAP：降解物基因活化蛋白（catabolic gene activation protein） 降低cAMP浓度 使CAP呈失活状态 乳糖操纵元的正调控 Glc 当缺乏Glc的环境中 当有