氧化葡萄糖酸杆菌GDHK的葡萄糖培养基优化及其催化2丁二醇生成.PDFVIP

第 26 卷第 4 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.4 Vol.26 2012 年 8 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Aug. 2012 文章编号：1003-9015(2012)04-0692-06 氧化葡萄糖酸杆菌 GDHK 的葡萄糖培养基优化及其催化 2,3-丁二醇 生成乙偶姻的性能研究 张敏华, 韦柳静, 祝 坤, 花 强 (华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室, 上海 200237) 摘 要：在前期的工作中对氧化葡萄糖酸杆菌的膜结合葡萄糖脱氢酶基因(gdh)进行了敲除，已得到一株工程菌株 GDHK[1] ，去除了由于该酶的存在而导致葡萄糖培养基容易酸化的途径，从而促进细胞在葡萄糖上的生长。为了更有 效地利用葡萄糖这一相对廉价的碳源、降低氧化葡萄糖酸杆菌的生物催化成本，首先用正交实验方法对GDHK 的葡萄 糖培养基优化，优化结果显示最优的葡萄糖培养基配方为：葡萄糖40 gL1，酵母粉20 gL1，硫酸铵0.5 gL1，磷酸 二氢钾4 gL1，七水硫酸镁0.5 gL1 。用优化好的培养基配方测定GDHK 的生长，最终菌浓从0.6 gL1 提高到0.75 gL1， 提高了25% 。其次，实验还探讨了原始菌621H 和敲除菌GDHK 分别在葡萄糖、山梨醇、甘露醇和甘油这4 种碳源培 养基上培养所得的静息细胞催化2,3-丁二醇生成乙偶姻的影响。实验表明，在葡萄糖培养基上生长的GDHK 得到的静 息细胞催化效果最好，反应进行到12 h，乙偶姻的转化效率已达到80.00%，浓度为31.30 gL1，是同样在葡萄糖上生 长的原始菌细胞催化能力的 13 倍，同时也是其他培养基的 1.2~1.5 倍，而葡萄糖的用量也只有传统的其他碳源用量的 一半，这些都说明用葡萄糖代替其他多元醇，作为工业上培养氧化葡萄糖酸杆菌催化乙偶姻生产的碳源，降低生产成 本的策略具有较好的应用前景。 关键词：氧化葡萄糖酸杆菌；葡萄糖培养基优化；2,3-丁二醇；乙偶姻 中图分类号：Q939.97 文献标识码：A Optimization of Culture Medium Containing Glucose and the Study on Process of Producing Acetoin from 2,3-Butanediol with GDHK of Gluconobacter Oxydans ZHANG Min-hua, WEI Liu-jing, ZHU Kun, HUA Qiang (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract: The gdh gene encoding membrane-bound glucose dehydrogenase of G. oxydans was knocked out to obtain the GDHK strain in our previous study, so the growth inhibition of G. oxydans was relieved with the removal of acidification of the cult