酶工程第三章 细胞工程产酶.ppt

;初级代谢和次级代谢; 在这些物质的合成中的任何环节发生障碍，有可能引起生长停止，甚至导致机体发生突变或死亡。; 次级代谢是某些微生物为了避免代谢过程中，某种代谢产物的积累造成的不利作用，而产生的一类有利于生存的代谢类型，通常是在生长后期合成。 通过次级代谢合成的产物称为次级代谢产物。 这些代谢产物并不是微生物生长所必需的，即使在这些代谢的某个环节上发生障碍，也不会导致机体生长停止或死亡，仅仅是影响了机体合成次级代谢产物的能力。通常它们以多组分的形式存在。 ; 有学者认为这是某些生物在一定条件下通过突变获得的一种适应生存方式，或是一种解毒方式，对产生菌的生存仍可能有一定的价值。 ; 次级代谢产物的种类很多，如氨基糖衍生物、苯醌、香豆素、环氧化合物、麦角生物碱、戊二酰胺、吲哚衍生物、内酰、萘、核苷、肽、喹啉、吡咯、吩嗪、多烯、聚乙炔、萜烯、四环类抗生素等。 有的次级代谢产物含有特殊的化学键，例如，β-内酰胺环、有修饰过的氨基酸组成的环肽、聚乙烯和多烯的不饱和键、大环内脂类大环等。; 催化初级代谢产物合成的酶专一性强， 而催化次级代谢产物合成的某些酶专一性不强。 初级代谢和次级代谢类型既有区别，又是紧密联系着的。 ;第一节 植物细胞培养产酶 一、植物细胞的特性 二、植物细胞培养的特点 三、植物细胞培养的工艺条件及其控制 四、植物细胞培养产酶的工艺过程 ; 动植物细胞培养是通过特定技术获得优良的动、植物细胞，然后在人工控制条件的反应器中进行细胞培养，以获得所需产物的过程。 植物细胞培养的主要目的是生产色素、药物、香精、酶等次级代谢物。 动物细胞培养的主要目的是获得疫苗、激素、多肽药物、单克隆抗体、酶、皮肤等人体组织、器官等功能性蛋白质。;第一节 植物细胞培养产酶和有用次生代谢产物; 1902年德国植物生理学家哈勃兰德（Haberlandt）首次提出分离植物单细胞并将其培养成植株的设想，并首次提出细胞培养的概念。 这一论述的依据就是植物细胞全能性学说(cell totipotency)。 所谓细胞的全能性(totipotency)是指个体某个器官或组织已经分化的细胞在适宜的条件下再生成完整个体的遗传潜力。; 1965年，由Vasil和Hildebrandt用单个分离的细胞培养成一个完整植株，细胞全能性得到实现。 在这一理论的指导下，经过一个世纪的发展，植物细胞培养已经建立起专门技术，形成新的学科。;一、植物细胞的特性 （1）植物细胞比微生物细胞大得多，体积比微生物细胞大103-106倍；植物细胞的体积也比动物细胞大。 （2）植物细胞的生长速率和代谢速率比微生物低，生长倍增时间较微生物长；生产周期也比微生物长。 （3）植物细胞和微生物细胞的营养要求较为简单。; （4）植物细胞与动物细胞、微生物细胞的主要不同点之一，是大多数植物细胞的生长以及次级代谢物的生产要求一定的光照强度和光照时间。 （5）植物细胞与动物细胞一样，对剪切力敏感。 （6）植物细胞和微生物、动物细胞用于生产的主要目的产物各不相同。; 植物细胞主要用于生产色素、药物、香精和酶等次级代谢物；;; 植物细胞培养生产各种天然产物，与从植物中提取分离这些物质相比，具有如下显著特点： 1.提高产率 使用优良的植物细胞进行培养生产天然产物，可以明显提高天然产物的产率。 ;2.缩短周期 植物细胞生长的倍增时间一般为12-16h，一般生产周期为15-30天，这比起微生物来是相当长的时间，但是与完整植物的生长周期比较，却是大大地缩短了生产周期。 ;3.易于管理，减轻劳动强度 植物细胞培养在人工控制条件的生物反应器中进行生产，不受地理环境和气候条件等的影响，易于操作管理，大大减轻劳动强度，改善了劳动条件。 ;4.提高产品质量 植物细胞培养的主要产物的产率较高，杂质较少，在严格控制条件的生物反应器中生产，可以减少环境中有害物质的污染和微生物、昆虫等的侵蚀，产物易于分离纯化，从而提高产品质量。 ;5.其他 对剪切力敏感、生产周期长 （缺点） 生长和代谢需要一定的光照。 ;三、植物细胞培养的工艺条件及其控制;1.外植体的选择与处理; 将外植体切成0.5-1cm左右的片段或小块，用70%-75%的乙醇溶液或者5%次氯酸钠、10%漂白粉、0.1%升汞溶液等进行消毒处理，再用无菌水充分漂洗，以除去残留的消毒剂。 ;2.植物细胞的获取;（2）愈伤组织诱导法 愈伤组织是一种能迅速增殖的无特定