体内药分的设计与评价.pptVIP

（四）准确度和精密度（Accuracy Precision） 1.00 n=5 10.0 +血浆 n=5 50.0 n=5 同一天 Inter-Day 1次/日; 连测5天 Intra-Day 3*5=15 分 析 批 同一批 连续三批 Inter-Batch Intra-Batch （五）稳定性（Stability） 标准溶液 短期室温 长期低温(-4 ℃,-20 ℃) 生物样品 短期室温 长期低温(-20 ℃,-70 ℃) 反复冷冻－解冻 （六）提取回收率（Extraction Recovery） 从生物样本基质中回收得到分析物质的响应值除以标准品产生的响应值即为分析物的提取回收率。 也可以说是将供试生物样品中分析物提取出来供分析的比例。考察高、中、低3个浓度的提取回收率，其结果应精密并具有可重现性。 考察生物样品预处理过程造成的药物损失程度 （六）提取回收率（Extraction Recovery） 回收率 (%)=A测/A真×100% A测：被测药物标准品加入空白样品中，按设定方法处理、进样测定，测得的色谱峰面积 A真：纯品溶剂溶解并稀释使其浓度与第一份处理后浓度一致，进样测得的色谱峰面积 A测=A药/A内×100% A真=A药’/A内’×100% 内 标 法 0.5 ml Plasma Sample 50μl IS 50μl 混匀 碱化 乙酸乙酯 5 ml 涡旋3min 3500 rpm 离心 8 min 上清液 4 ml 氮气吹干 残渣物 MP复溶 200 μl 20 μl 上清液 进样分析 （六）提取回收率（Extraction Recovery） 0.5 ml Plasma Sample 50μl IS 50μl 混匀 1.5 ml MeOH 涡旋 1min 16000 rpm 离心 8min 20 μl 上清液 进样分析 （六）提取回收率（Extraction Recovery） 第三章 体内药物分析方法的建立与确证 药物分析教研室 设计依据 建立的一般步骤 验证的内容与要求 Distribution Metabolism Absorption Excretion 第一节 分析方法的设计依据 体内药物分析方法的选择，一般根据药物的结构、理化性质、体内药物浓度大小、干扰成分的多少，样品的预处理方法、试验条件和目的等因素综合考虑，方可选择出供生物样品中药物及其代谢物含量测定的分析方法。 1. 测定药时曲线 药-时曲线 C-T (Concentration-Time curve) 以时间为横坐标，药物的一些特征数量（如体内药量、血药浓度、尿药排泄速度、累积尿药量等）为纵坐标绘制的曲线 （一）明确分析方法设计的目的要求 （一）明确分析方法设计的目的要求 ? —— ?口服；? —— ?静脉注射 给予650mg阿司匹林后的药-时曲线比较 生物利用度(Bioavailability)：剂型中的药物被吸收进入血液的速率和程度。 （一）明确分析方法设计的目的要求 2. 药代动力学研究 要求 ——同时测定原形药物和代谢产物 检测 ——宽线性范围高灵敏度(ng、pg级) 高专属性(原形药物及其代谢产物的分离) 原形药物和活性代谢物同时存在可能对测定浓度的准确性产生影响 （一）明确分析方法设计的目的要求 例：环孢霉素A监测测定结果荧光偏振免疫法比高效液相色谱法约高30%，临床调整剂量时，必须参照各自的有效血药浓度标准进行 （一）明确分析方法设计的目的要求 3. 临床药物监测 TDM (Therapeutic Drug Monitoring) 单剂量给药后的时-效曲线 方法——尽量简便、易行；适用于长期、批量样品测定 ——大多采用UV、RIA或EIA等 （二）调研文献了解待测药物的特性 已报道药物的测定，应综览文献，掌握已解决和尚在的问题，同时获得待测药物的详细理化特性及其在体内的代谢情况。 文献报道方法只可借鉴，不可生搬硬套！ 无文献报道的新药品，根据新药的化学结构，理化特性，在体内存在的状态及代谢情况，参考同类型药物的文献资料，设计全新的方法。 （二）调研文献了解待测药物的特性 1.待测药物的理化性质 药物的pKa值、亲脂性、溶解度、分配系数等——预处理及检测方法 具有亲脂性——在适当的pH值下用溶剂萃取 具有强极性或亲水性——沉淀蛋白、固相萃取、离子对萃取或衍生化后萃取等 具有挥发性——GC测定法 具有光谱或电化学特性——分析检测方法 药物的稳定