血小板源性生长因子对体外兔关节软骨细胞的生物学行为的影响.pdfVIP

438 HEJOURNALOFHONEAN口JOINT INJURYV.I.16.N0.6.Nov.20tn 血小板源性生长因子对体外兔关节 软骨细胞的生物学行为的影响 刘刚’胡如’韩一生’脚 八 摘要 目的 了解血小板源性生长因子 (PDGF)对体外生长的兔关节软骨细胞的生物学效应，为组织工程构件软骨提供理论 基础。方法 取第3代兔关节软骨细胞体外单层培养，培养液DMEM中以终浓度分别为3,10,30,100,300pg.La的 PDGF各作用细胞2,4及6d，以MI，法检测细胞的增殖情况，并在3pg.LtPDGF作用下，采用流式细胞技术进行细胞周 期亚时相分析。同时，检测基质中糖醛酸的变化反映蛋白多糖含量的变化。结果 结果显示在较低浓度 ((3pg.L-)PDGF即 能明显促进培养软骨细胞的增殖，且以第2d刺激效果最明显;增加因子浓度不能进一步促进细胞增殖。在3-3001ag.Lt浓 度下糖醛酸的含量变化不显著。结论 PDGF对培养软骨细胞以剂量时间依赖性方式刺激其增殖但对细胞的分泌功能代谢无明 显影响。 美.词 关节软骨细胞:细胞培养:血小板源性生长因子 EffectsofPDGFonCulturedRabbitArticularChondroc洲es LiuGang,HuYunyu，HanYisheog.Depatrmentofartlurpaedics,Xi,finghospital,FourthMilitaryMedicalUmrrsity.Xian. 710032 Abstract 鞠《ectiveTheeffectsof内telet-derivedgrowthfactor(PDGF)onthemetabolismofarticularchoncimcytesandtheirmatrix wereexamined.MethodsThemonolayercellsobtainedfrom4-weekrabbitwereculturedinDMEMcontaining10%fetalcalfserum andweretreatedwithPDGFatdosesrangingfrom3to300pg.L-Iover2,4and6-dayperiods.ResultsWefoundthatPDGFstimu- lated,inadoseandtime-dependentmanner,cellproliferation.Themaximaleffectofstimitationoccurredat3pg.Lwithin2-dayafter treatment.Whilematrixmetabolism,whichweredemonstratedbymeansofglucumnicacidcontent,~ noaffected.Conclusion It wasshowedthatcellprolifertimintheculturedaricularchondrocyteswerestimulatedbyPDGF,butchangeofmatrixmetabolism~ to seen Keywards Articularchondrocytes;Culture;PDGF 血小板源性生长因子 (Platelet-derivedgrowth man，再次Hanks液冲洗。再将软骨片切成0.1cmx0.5二 factor,PDGF)由血小板、单核细胞及内皮细胞等 XO.5。的小粒，分别经0.2%胰蛋白酶、0.2%胶原醉 (上 合成，对间充质来源的细胞有较强的促细胞分裂、 海浦东生化试剂厂)，于37℃消化30及60min，用含100 ml.L;l小牛血清 (杭州四季青生物工程材料研究所)的 促基质合成的作用，是体内重要的细胞因子之 一[[1.21随着软骨组织工程学的发展，血小板源性 DMEM (USAGbm公司)终止消化后，过滤除碎块，逮液