超广谱β内酰胺酶与23种抗生素耐药分析.docVIP

精品论文 参考文献 超广谱β内酰胺酶与23种抗生素耐药分析 邹文钰 孙永惠 钟海平 刘和琛（江西省新余新钢中心医院检验科 江西新余 338001） 【摘要】目的 1.开展超广谱beta;-内酰胺酶（ESBLS）的表型确证实验。2.了解本院产超广谱beta;-内酰胺酶（ESBLS）阳性菌株对哪些药物多重耐药。方法 细菌鉴定和药敏采用珠海黑马微生物分析系统，ESBLs确证试验采用纸片扩散法，参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准判断结果。以头孢他啶，头孢噻肟为底物，克拉维酸为酶抑制剂检测beta;-内酰胺酶。结果 ESBLs确证试验采用纸片扩散法，条件要求不高，结果容易判读，准确可靠。产ESBLs菌株耐药率和非产酶菌株相比（除外头孢哌酮/舒巴坦，氨苄西林/舒巴坦，阿米卡星，美满霉素）差异有显著性。结论 1.ESBLs确证试验采用纸片法扩散法非常适合在实验室常规检测;2.说明耐药质粒不但携带对ESBL的耐药基因，而且还携带对其他抗菌素的耐药基因，表现为多重耐药。 【关键词】beta;-内酰胺酶 确证试验 耐药率 检出率 耐药分析 近年来，临床上三代头孢菌素等超广谱beta;-内酰胺酶类抗生素广泛使用，使得超广谱beta;-内酰胺酶（ESBLs）菌株的检出率逐年上升。超广谱beta;-内酰胺酶（ESBLs）是一类水解相当广泛的beta;-内酰胺酶，不仅能水解青霉素和一，二代头孢菌素，还能水解三代头孢菌素及单环beta;-内酰胺酶类。我们发现ESBLS阳性菌除了对上述药物耐药以外，对其他抗生素的耐率也比ESBLS阴性菌高。为了得到确切证据，我们进行了本项目的研究。我们对2010年3月～2011年12月本院临床标本首次分离的大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯氏菌产ESBLs的情况进行了研究。 1 材料和方法 1.1菌株来源 试验菌株全部为我院从2010年3月～2011年12月本院临床感染性标本首次株136株，其中大肠埃希氏菌73株，肺炎克雷伯氏菌63株。 1.2细菌鉴定及药敏试验 细菌鉴定及药敏试验，使用珠海黑马微生物分析系统 1.3ESBLs的表型确证实验 采用纸片扩散法。将被检菌悬液配成0.5号麦氏标准管,均匀涂布于M-H培养基。将头孢他啶30ug，头孢他啶/克拉维酸30ug/10ug和头孢噻肟30ug，头孢噻肟/克拉维酸30ug/10ug纸片分别贴到M-H琼脂表面，放35℃温箱，16～18小时判读结果。对2个中任何一个药物，在加克拉维酸后的抑菌圈，直径与不加克拉维酸的抑菌圈相比，ge;5mm时，判为ESBLs阳性。确证试验所用纸片法及培养基均购自杭州天和微生物试剂公司。ESBLs阴性质控菌为大肠埃希氏菌ATCC25922，阳性质控菌为肺炎克雷伯氏菌ATCC700603。 2 结果 2.1产ESBLs菌株的检出率 73株大肠埃希氏菌中，ESBLs阳性38株，ESBLs检出率为52.1%；63株肺炎克雷伯氏菌中，ESBLs阳性21株，ESBLs菌检出率为33.3%。 2.2耐药率 ESBLs阳性菌株和ESBLs阴性菌株耐药率见下表：（为便于统计，将中介计入耐药）。 按NCCLS规定，如果确认为超广谱beta;-内酰胺酶菌株，不管传统药敏试验结果如何，对所有三代头孢菌素和氨曲南均应报告耐药。 2.3耐药分析 2.3.1经过统计学分析，无论是ESBLS阳性菌，还是ESBLS阴性菌，所有被检菌株均对亚胺培南，美罗培南敏感。 2.3.2ESBLs阳性菌对头孢哌酮/舒巴坦，氨苄西林/舒巴坦，阿米卡星，美满霉素的耐药率和ESBLs阴性菌相比差别无显著性（Pgt;0.05）。 2.3.3ESBLs阳性菌对庆大霉素的耐药率高于ESBLs阴性菌，有??著性差别(Plt;0.05)。 2.3.4ESBLs阳性菌对头孢唑林，氨苄西林，头孢噻肟，头孢吡肟，头孢曲松，哌拉西林，头孢呋辛，头孢他啶，氨曲南，头孢克洛，复方新诺明，阿莫西林/棒酸，氨苄西林/舒巴坦，环丙沙星，左氧氟沙星，四环素的耐药率高于ESBLs阴性菌,有高度显著性差别(Plt;0.01)。 3 讨论 大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌ESBLS检出率较高，ESBLs阳性菌对庆大霉素，头孢唑林，氨苄西林，头孢噻肟，头孢吡肟，头孢曲松，哌拉西林，头孢呋辛，头孢他啶，氨曲南，头孢克洛，复方新诺明，阿莫西林/棒酸，氨苄西林/舒巴坦，环丙沙星，左氧氟沙星，四环素的耐药率高于ESBLs阴性菌，说明耐药质