在线前处理GPCGCMS 联用技术分析检测乳制品（奶粉、牛奶）中的三聚氰胺.pdfVIP

在线前处理 GPC-GCMS 联用技术分析检测 乳制品（奶粉、牛奶）中的三聚氰胺 摘要 GPC 凝胶净化色谱和SPE 固相萃取是目前在食品安全检测实验室常用的样品前处理方 式。在线 GPC 可以实现 GPC 净化的在线完成，对乳制品中三聚氰胺的分析中能够进行较好 的去除基质，使衍生化进行得更加彻底，检测限可以达到0.01mg/kg 。 关键词 凝胶净化色谱；气质联用仪；三聚氰胺；前处理 1 实验部分 仪器条件和参数 岛津在线前处理联机系统 GPC-GCMS 1.1 GPC 条件： 流动相：丙酮+环己烷＝3+7，流量 0.1mL/min 。进样量20uL 。 1.2 GCMS 条件： 色谱柱：DB-5ms （30m ×250um ×0.25um ）； 柱温：90℃，5min；15℃/min；190，0min；30℃/min；290，0min。 PTV 进样口：120℃，5min；80℃/min；280，8min。5min 后关闭分流阀。 质谱条件：scan 模式，扫描范围 m/z 86～400。SIM模式：m/z 342、327、328、171，定量 离子 m/z 342。 色质谱图见图 2～6。 2 前处理方法 提取净化方法参照 NY/T 1372-2007 。 取样 1～5g，按比例加入 10 倍量的二乙胺/水/ 乙腈=10/40/50(体积比)提取溶剂，混匀超 声提取，取约 1.5mL 混合液，10000rmp 离心 5min，准确吸取 1mL 上清液过 MCX （Waters ， 3cc，60mg ）柱，依次用3mL 水和 3mL 甲醇洗涤固相萃取柱，最后用3mL 5 ％氨化甲醇洗 脱，洗脱液于 70℃氮气吹干。按法衍生化，最后用氮气吹干衍生试剂，加入 1mL 流动相（GPC ） 后 GPC-GCMS 测定，进样 20uL 。 如图 1，三聚氰胺 TMS （3TMS ）衍生物的GPC 保留时间为 3.29min （4min 为溶剂峰）， 按仪器说明书编制 GPC-GCMS 的GPC 部分的条件。 3 结果与讨论 3.1 GPC 在线前处理方法的优势 按 NY/T 1372-2007 （GC-MS 法检出限 0.05mg/kg ），取 5g 样品，50mL 提取液，最后取 10mL （相当于1g 样品）提取液过阳离子交换柱净化，很容易造成净化柱堵住，且取 10mL 过柱后由于杂质较多，衍生化的重现性很难做。本法只取 1mL （相当于0.1g 样品）提取液 过阳离子交换柱，液体流过很通畅，最后净化效果与过柱 10mL 比要好得多。本方法检出限 为 0.05mg/kg （相当于0.1g 样品）。因为净化效果较好，衍生后的定容体积可以到 0.2mL， 检测限可以到 0.01mg/kg （相当于0.1g 样品）。 3.2 提取液的选择 同时测试了美国FDA 用于测定宠物饲料的方法，用甲醇提取奶粉中的三聚氰胺，回收 率很低（小于 10％），且提取液中糖的含量较高，影响最后三聚氰胺的衍生化产率。用其它 有机溶剂提取的方法都存在糖对衍生化的干扰，最后都要用阳离子交换的方法去除。 图 1 标样和样品的 GPC 图 % 100 149 50 97 207 327 86 111 133 171 191 223 238 285 342 355 0 253 267 295 368 386 400 100 150 200 250 300 350 400 图2 40ng/mL 三聚氰胺－3TMS （13.9min）标样SCAN 模式下