通过AFM观察内皮细胞不同阶段纳米结构的变化及异常黑胆质成熟剂疗法对“退行性”硬化性主动面瓣膜病的影响.docVIP

精品论文 参考文献 通过AFM观察内皮细胞不同阶段纳米结构的变化及异常黑胆质成熟剂疗法对“退行性”硬化性主动面瓣膜病的影响 新疆医科大学第一附属医院心脏外一科（830054） 基金项目：新疆维吾尔自治区自然科学基金重点项目，编号：2014211C060。 3、作者简介：艾斯卡尔middot;沙比提（1973—），男，新疆人，硕士，心脏外一科主任医师，副教授，硕士生导师。 通讯作者：哈木拉提middot;吾甫尔，新疆医科大学校长，博士后，博士生导师，主任医师，教授。 摘要：目的 异常黑胆质成熟疗法能否影响“退行性”硬化性主动脉瓣膜病的发展。方法 健康新西兰纯种雄性白兔100只,适应性喂养1周后,实验开始前处理20只，剩余80只随机分为4组，即正常对照组(N组)、高脂饮食组(HC组)、阿托伐他汀干预组(AI组)、异常黑胆质成熟剂干预组（MI组）。于0和8周末两点采血行血脂分析。在0,2,4,6,8周时间段，取出主动脉瓣膜标本，AFM下观察内皮细胞纳米结构。结果 HC组与N组相比，TG，TC，LDL，HDL测量结果均有明显差异，（P＜0.01）。MI组HC组相比，TG，TC，LDL，HDL的测量结果均有显著差异（P＜0.05）。AFM50umtimes;50um扫描下HC组与MI组内皮细胞长径6周、8周均有明显差异（P＜0.01）。与HC组相比，MI组内皮细胞长径有明显差异（P＜0.01）。AFM500nmtimes;500nm扫描下HC组内皮细胞表面隆起直径8周有明显差异（P＜0.01），高度6周，8周有明显差异（P＜0.01）。与HC组相比，MI组内皮细胞表面隆起直径8周有明显差异（P＜0.01），高度8周有差异（P＜0.05）。结论 随之时间的延长，高脂饮食组主动脉内皮细胞受到明显破坏而异常黑胆质成熟剂对内皮细胞起到保护作用。 关键词：退行性钙化性主动脉瓣膜病(DCAVD)；异常黑胆质成熟剂；原子力显微镜（AFM）； 主动脉瓣膜钙化可引起主动脉瓣狭窄、关闭不全等疾病，导致老年退行性瓣膜病的重要病理改变。西方国家整体人群中发病率达2.5%，严重危害患者生命安全，造成沉重的社会负担。由于除手术外缺乏有效的治疗手段，因此该探讨主动脉瓣瓣膜钙化的机制，研究阻断其病理过程进展的可能性已经成为近年来心脏外科医师关注的热点之一[1]。 AFM以其能够以高分辨率和简单制样方法观察生物样品的表面精细结构的特征,而在生物医学领域的应用逐渐广泛[2-4]。AFM是通过检测样品表面和针尖相互作用力的变化来获得样品表面信息的,便可获得样品表面起伏的结构图像[5]。 根据维吾尔医学体液论大量研究结果及研究发现异常黑胆质成熟剂具有抗氧化、抗钙盐沉积、抗炎、免疫调节、抗血小板聚集、改善血液流变学和抗血栓形成的功效[6]。故本研究组认为同过异常黑胆质的调整血粘度，抗钙盐沉积，抗炎，抗氧化等作用，利用AFM证实，成熟剂疗法能否影响“退行性”硬化性主动脉瓣膜病的发展，从而达到延缓疾病的发展。 材料与方法 1、药品与试剂 阿托伐他汀（辉瑞制药有限公司，国药准字产品批号L27840）。异常黑胆质成熟剂 异常黑胆质成熟剂是由破布木果、牛舌草、铁线蕨、刺糖、蜜蜂花、熏衣草、地锦草等药物组成[7]。根据异常黑胆质的成熟剂和清除剂及其制备方法及质控标准严格按照专利号C082130082．8。 高脂饮食 按文献报道方法，家兔86.5%标准饲料配方中添加1%胆固醇，7.5%蛋黄粉，5%猪油，按动物体重5%给予。 Anti-CD68单克隆抗体、CD3单克隆抗体、CD31单克隆抗体、骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)单克隆抗体等由新疆乌鲁木齐欧易生物医学科技有限公司提供。 2、技术服务与主要仪器 血脂分析由新疆医科大学第一附属于医院检验科提供。原子力显微镜上海复旦大学纳米研究所提供，型号：Bruker Dimension Icon。 3、动物来源 由新疆维吾尔自治区医学实验动物中心提供，并经自治区医学实验动物中心委员会认证和批准。 4、分组及给药 健康新西兰纯种雄性白兔100只,体重1.8一2.4千克,适应性喂养1周后,实验开始前处理20只，剩余80只随机分为4组，即正常对照组(N组):20只,喂饲普通颗粒兔饲料;高脂饮食组(HC组):20只,予高脂饮食喂养;高脂饮食加阿托伐他汀干预组(AI组):20只,高脂饮食喂养同时予阿托伐他汀(4mg/kg.d)灌胃；高脂饮食加异常黑胆质成熟剂组（MI组）：20只，高脂饮食喂养同时予异常黑胆质成熟剂5.069/kg(5.0g成熟剂溶于1ml蒸馏水中,生药量17.