第二章 提取分离与鉴定的方法与技术4.ppt

天然药物成分极性 天然药物成分类型 适用的提取溶剂 强亲脂性 挥发油,脂肪油,蜡,甾醇类, 石油醚,已烷 脂溶性色素, 某些苷元 亲脂性 苷元,生物碱,树脂,醛,酮, 乙醚,氯仿 醇,酯,有机酸,某些苷类 中等极性 某些苷类（如强心苷等） 氯仿:乙醇(2:1) 某些苷类（如黄酮苷等） 乙酸乙酯 某些苷类（如皂苷、蒽醌苷等） 正丁醇 亲水性 极性很大的苷,糖类, 丙酮,乙醇,甲醇 氨基酸,某些生物碱盐 强亲水性 蛋白质,黏液质,果胶,糖类, 水 氨基酸,无机盐类 根据物质的溶解度差异进行分离 ——调节pH 酸、碱、两性成分 调节pH——改变的分子存在状态——改变溶解度 4 萃取技术 （1）简单萃取法 （2）逆流连续萃取法 （3）逆流分溶法（ CCD， countercurrent distribution） （4）液滴逆流分配法（色谱） （DCCC，droplet countercurrent chromarography） （5）纸色谱（PC，paper chromatography） （6）液液分配柱色谱 （7）高速逆流色谱 （HSCCC，high speed countercurrent chromarography） （1）简单萃取法*** (分次萃取)：是常用的一种萃取方法，小量萃取可使用分液漏斗进行。 β?50 A．有机溶剂/水 B．有机溶剂/酸、碱水 pH—— 物质存在状态——溶解性——K C．pH梯度萃取 梯度调节pH，每次改变一种成分的存在状态，依次分离 特点：操作简便，设备简单，实验室常用。但溶剂用量大、 易乳化。 适用范围：适用于分配系数差异较大成分的分离。 例：HA1、HA2、B，且HA1 ?HA2，如何分离? (3)逆流分溶法（CCD)：是一种在加样量一定，容量也一定的两相溶剂中，经多次移位萃取分配而使混合物中的各种成分分离的方法。也称逆流分配、逆流分布或反流分布法等。 适用范围：中等极性、分离因子较小（β＜50）及不稳定的物质。 工作原理：多次、连续的液液萃取 特点：避免手工操作，分离效率高，操作条件温和，试样回收容易。但溶剂用量大，机械操作导致破损、漏液、易乳化。 提示：混合物各成分的分配系数很接近时，一般方法不易分离时可用此法。但操作繁琐，消耗溶剂多，含量微小的成分易损失于大体积的溶液中，易乳化等，极性过大或过小的成分，或分配系数受温度或浓度影响过大及易乳化的溶剂系统均不宜采用此法。 操作技术： 装置：分为三个部分。微型泵、移动相溶液贮槽和试样液注入品组成输液部分；第二部分由300-500根内径约2mm、长度为20-40cm的萃取管连接而成；第三部分由检出器和分步自动收集仪组成。 操作：先将选择好的两相溶剂中的固定相充入全部萃取管内，然后从加样口注入已溶于（1:1）两相溶剂中的待分离试样，再由微型泵注入移动相，移动相在萃取管中形成液滴，不断地与固定相有效地接触、摩擦形成新的表面，促使演技在两相溶剂中实现充分的分配，获得很高的分离效果。不易乳化或产生泡沫，若用氮气驱动流动相，可避免被分离成分的氧化。从萃取管中流出的移动相通过检出器进行分部收集，完成液滴逆流分配的全过程。 适用范围：皂苷类化学成分的分离。 特点：使用溶剂较少，可定量回收试样，分离效果比CCD法好。 提示：广泛用于分离纯化多种天然药物化学成分，如：皂苷、生物碱、蛋白质、多肽、酸性成分及糖类等。分离效果好！ 复习思考题 1.两相溶剂萃取法的原理是什么？什么是分配系数？ 2.分次萃取如产生乳化，应如何“破