生物学--生物染色剂.docVIP

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生物染色剂 斐林试剂:检测可溶性还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖),沸水浴加热,出现砖红色沉淀。         DNA在细胞中分布,遇到DNA出现绿色。   RNA在细胞中分布,遇到RNA出现红色。   DNA的存在,DNA遇到二苯胺,水浴加热出现蓝色。         CO2,二氧化碳可以使澄清的石灰水变浑浊。               DNA分子的双链骨架切割,一种限制性核酸内切酶识别一种序列,而且从特定的位点切割。限制性核酸内切酶破坏DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。   DNADNA片断连接起来。DNA连接酶连接DNA分子的骨架上的磷酸二酯键。   DNADNA复制的时候需要,将单个脱氧核苷酸一个一个的连接起来,DNA聚合酶连接DNA骨架上的磷酸二酯键。   DNA的双螺旋解开,解旋酶破坏的是氢键。(也可以用高温解旋)   RNADNA转录为mRNA分子。      RNA逆转录形成DNA分子。 生物染色剂 染色剂名称 化学性质 作用 典型实验 备注 碘-碘化钾 遇淀粉变蓝色 对细胞内淀粉的检验 细胞内后含物质的测定 ? 苏丹Ⅲ 红棕色粉末,溶于氯仿、冰乙酸,稍溶于乙醚、醇、丙酮、石油醚、不挥发油、热甘油和挥发油、不溶于水 对细胞内脂肪及类似物质的检验 细胞内后含物质的测定 密封保存 4%铁矾 ? 色譜分析试剂 胞间连丝观察 ? 0.5%苏木精 ? ? ? 氧化苏木精 棕红色结晶、有黄绿色金属光泽、易溶于稀NaOH,呈鲜红色,微溶于醇和醚、不溶于苯和氯仿、与金属生成盐类 细胞核染色、指示劑 ? ? 改良品红 ? 能使粘朊、弹性组织及嗜品红的颗粒染色、中枢神经的核染色、细菌学中用于鉴别结核杆菌 细胞有丝分裂的观察 最强的核染料 碱性品红 绿色金属光泽结晶,溶于乙醇、戊醇,微溶于水、溶液红色,不溶于醚 ? 品红的盐酸盐 1%醋酸洋红 ? ? 蝗虫精巢的压片法观察动物精母细胞减数分裂染色体 密封避光保存 洋红(胭脂红) 鲜红色片状,能溶于硼砂液,其碱性溶液为深红色,部分溶于热水,不溶于冷水或稀酸 ? ? ? 0.1%结晶紫 绿色有金属光泽结晶或深绿色结晶性粉末,易溶于醇。能溶于氯仿,尚溶于水,不溶于醚 ? ? 密封保存 地衣红(苔红素) 淡棕红色结晶粉末,溶于醇,丙酮和乙酸中呈红色在弱碱性的溶液中淡蓝色,几乎不溶于水,醚,氯仿,苯,CS2 鞭毛媒染剂 检验痰液中的弹性组织 密封保存 医药紫药水 ? ? ? ? 番红染液 ? ? 染色导管 ? 0.2%考马斯亮蓝R250 紫色粉末,微溶于热水和醇,不溶于冷水 蛋白质染色 凝胶电泳 植物细胞骨架的观察 密封保存 0.2%考马斯亮蓝G250 溶于醇和热水,微溶于冷水 ? ? ? 甲基绿—哌洛宁染液 ? 核染色剂 细菌染色 细胞核分离与鉴定 密封保存 不可久置 0.2%(或1%)詹纳斯绿B染液(janus green) 棕色、深棕色结晶粉末、溶于水呈蓝色、微溶于醇 专一性的染色线粒体 超活染色实验 存放于冰箱内 碱性染料 1%中性红溶液 深绿色、棕色或灰黑色粉末;溶解度:水4%、无水乙醇1.8%,几乎不溶于二甲苯其水溶液或醇溶液呈红色 对液泡的染色有专一性,细胞核、细胞质完全不着色 酵母菌活体染色 与健那绿共用于血液体外活体染色 神经细胞的尼氏小粒染色 密封保存 弱碱性染料 荧光染料 ? 酸性品红 ? 检定游离氯 结缔组织染色 ? 二丙酸酯 生活性强的细胞紫外线下发出黄绿色荧光 分解酶活性 ? ? 吖啶橙 橙红色粉末,易溶于水、乙醇、丙酮及热苯,能溶于稀酸 使细胞核DNA在荧光显微镜下发出绿色荧光 ? 密封干燥保存 溴化乙锭 深红色结晶或粉末,无气味,有持久的苦味,室温下稳定溶于水、乙醇、甲醇 ? 琼脂糖凝胶电泳分离鉴定核酸结构 密封避光保存,强致癌物 高中几种染色剂的使用原理、使用方法归纳 1。甲基绿和吡罗红: 实验原理: 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.利用甲基绿,吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布. 试剂及配制方法 (1)试剂质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,乙酸钠,乙酸,蒸馏水,吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉,可以分别购买甲基绿和吡罗红G,然后按A液的第二种方法配制(见下文)。 (2)染色剂的配制 ①染色剂A液的两种配制方法 第一种方法:取吡罗红甲基绿粉1 g,加入到100 mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。 第二种方法:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到1

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