第二章 药源微生物及微生物药物的筛选技术PPT.ppt

2、含高浓度磷酸盐的培养基 尽管低浓度的磷酸盐培养基有利于次级发酵代谢产物的合成这一观点被广泛接受，但是含有1%-2%无机磷酸盐的高浓度磷酸盐培养基也被成功地用于发酵生产硝吡咯菌素。 2%的无机磷酸盐使得硝吡咯菌素的合成变得更具重现性和更高的产量。 3、含高浓度其他盐的培养基 鉴于无机磷酸盐对微生物次级代谢产物的生物合成的普遍抑制作用已被充分证明，所以高浓度磷酸盐培养基被认为是一种极端的发酵条件。同样，高浓度的其他盐也可能形成这种有利于次级代谢产物合成的极端发酵条件。 例如：如A-60只在硫酸镁浓度高于2%的条件下才产生。 但是有关高浓度盐强烈刺激微生物次级代谢产物合成的机制现在还不清楚。 4、pH碱性的培养基 有些微生物可以在pH碱性条件下生长，并产生碱性胞外酶。许多放线菌和真菌属于这类嗜碱微生物，在碱性条件下这类菌可产生新的次级代谢产物。 如新型抗细菌和抗真菌肽No.1907的发现，是从生长在pH11培养液中发现的。 5、拟混合培养 通过两种微生物的混合培养来获得新的化合物，可能是一株菌产生了一种生物学上没有活性的代谢物，这种代谢物可以被第二株菌变成有活性的化合物。 然而这种方法的大规模筛选可能存在困难，如微生物个体生长速率等。 有一个混合发酵实验：一个镰刀菌菌株在培养基中生长4天后，将上清夜过滤除菌，加入2%的葡萄糖，然后接入各种微生物培养后发现在有的培养中出现了抗细菌活性，但在镰刀菌培养液中没有抗菌活性。 6、前体指导的生物合成 次级代谢过程中的酶常常表现出较低的底物专一性，合成的次级代谢产物通常是一大类结构相似的代谢物。因此，添加一定的外源前体可以获得所需产物的特定组分。 这一现象最早在产黄青霉菌合成青霉素的发酵中观察到的。青霉菌的培养物中含有青霉素G、青霉素X、青霉素K和青霉素F，而当向培养基中添加玉米浆时，只有青霉素G获得了较高的产量。 第四节 化学筛选 一、传统生物活性筛选系统面临的困难 1、一种可信的筛选方法的确定需要大量的研究工作和很长的时间。 2、一些因素的影响使得无数的次级代谢产物漏筛。 3、体外筛选的新化合物，在体内测定时生物活性会出现很大差别。 二、化学筛选的原则 1、首先是使用几个特殊的实验对代谢产物进行分离和检测，包括颜色反应鉴定代表性官能团。 2、对已分离的代谢产物的生物活性进行估计。 微生物制药Microbial Pharmaceutics 主讲教师：陈静博士 山东轻工业学院食品与生物工程学院 讲授内容 第一章 药物微生物与微生物药物 第二章 药源微生物及微生物药物的筛选技术 第三章 微生物药物的发酵技术 第四章 抗生素及耐药性 第五章 抗生素生产实例 第六章 疫苗 第七章 基因工程药物 第八章 生物转化与甾体药物 第二章 药源微生物及微生物药物的筛选技术 第一节 重要的药源微生物类群 第二节 药物微生物的筛选技术 第三节 药物筛选的发酵转化工艺 第四节 化学筛选 第五节 筛选模型 第一节 重要的药源微生物类群 一、放线菌 1、分布 主要生境土壤 2、特点 G+,好氧，链霉菌　 3、应用 氨基糖苷类，聚酮类，多肽类，核苷类　　 二、芽孢杆菌属 1、分布 主要生境土壤 2、特点 G+,好氧或兼性厌氧，枯草芽孢杆菌 3、应用 Ｂt,杆菌肽,短杆菌肽 粘细菌次级代谢产物的特点 （1）种类多 （2）结构新 （3）衍生物多 （4）化合物产生菌株的特异性不强 （5）作用对象特别 五、曲霉菌属和青霉菌属 1、分布 多居于土壤,温暖环境,植物,人或动物 2、特点 丝状真菌,多种孢子 3、应用 青霉素,洛伐他汀,灰黄霉素 六、海洋微生物 1、分布 沉积物细菌,深海细菌,共栖细菌,共生细菌 2、应用 抗肿瘤、抗心血管病、免疫调节剂、抗生素 海洋微生物活性物质的研究进展（自学） 七、极端微生物 1、分布和分类 嗜热菌,嗜冷菌,嗜碱菌,嗜盐菌,嗜酸菌,嗜压菌 2、应用 从1株嗜热菌Pseudomonas akbalia得到了抗真菌化合物pyochelin 抗肿瘤药物,抗抑郁药物等 极端环境微生物源活性物质的研究进展（自学） 第二节 药物微生物的筛选技术 新 微 生 物 药 物 筛 选 流 程 样品的采集 微生物的分离 微生物鉴定 发酵 生物活性鉴定 化合物的分离纯化 结构测定 新物质 临床前药理 临床试验 开发研究 新药开发？ 1、环境中有机质的含量及种类 2、采集季节 3、含水量 4、酸碱度 一、样品的采集 1、预处理 2、分离 （1）富集培养基进行富集培养 （2）平板划线 （3）斜面保藏 二、微生物的分离 三、发酵 第三节详细讲解 四、活性测定 抗菌药物：非致病菌为对象，采用琼脂扩散法测定活性，筛选生物活性物质。 也可以使用耐药和超敏菌种。 抗癌药物：