第四章 胚胎移植PPT.ppt

第四章 胚胎移植 ;第一节 概念、意义和发展简史;二. 胚胎移植的意义;1．提高优秀种畜的繁殖率;2．加速动物育种和品种改良进程 ;5．诱发肉牛（羊）怀双胎;6．作为研究手段;在猪，通过胚胎移植实验证明，维持妊娠的最少胚胎数目是2-4个；黄体数目并不限制窝重。 在绵羊，一般产1-2个羔的品种在接受移植胚胎后，可维持更多的妊娠；说明是排卵数而不是子宫容量致使某些品种更高产。 进行绵羊品种间胚胎移植已经证明，妊娠期的长度是由胎儿控制的，而与母体无关。 ;2）胚胎移植是胚胎工程各项技术的基础 体外受精、显微受精、动物克隆、转基因动物的产生等最终要通过胚胎移植技术来实现;三.胚胎移植技术的发展简史;3.3发展阶段 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功，之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎移植成功率达70-80%。;*;第二节 胚胎移植的生理学基础与基本原则;一.胚胎移植的生理学基础;2. 胚胎移植的基本原则;胚胎移植原则图解;第三节 胚胎移植的基本技术程序;一、供受体的选择与饲养管理;受体 土种动物或者本地品种 体格接近，营养良好 无疾病 繁殖生理特点与供体相似，比如多周期发情 移植前2个月进行编号和补饲;二.供体超数排卵 ;2.超数排卵的作用;排卵少有两个原因： ⑴ 是哺乳动物，特别是家畜的妊娠期较长，排卵的机会很少； ⑵是主要家畜都不是多胎动物，每次排卵排除的卵母细胞数只不过1-2个。单纯的胚胎移植只能解决第一个问题，使动物重复地发生暂时妊娠，而人为缩短动物的妊娠周期。而第二个问题的解决途径就是超数排卵。 ;2.2超排作用二，是它可被用来控制动物的排卵时间。 为避免因卵子老化而降低繁殖率，必须准确掌握动物的排卵时间，适时配种。在自然状态下，动物的排卵时间是受促性腺激素（主要是LH）高峰控制的。由于此高峰是由成熟卵泡所分泌的动情素正反馈作用诱发的，故其出现的时间往往与动物的发情行为紧密相伴。这样，若能准确地检查出发情开始的时间，也就能正确地估计出排卵的时间。然而，由于实践中人们不可能那样频繁地对动物试情，故难以准确地估计排卵时间。因此，为了准确地把握排卵时间，人们往往用激素来控制或调整动物的排卵过程。 ;3.超排方法;由于一般难以准确确定发情前期，故多采用注射PMSG来调整发情周期（卵泡发育），而后再注射LH，使动物按时排卵。在大多数动物（如牛、羊和猪），都是于黄体退化末期和发情前期之间注射PMSG，而后间隔一定时间注射LH或hCG。 而在实验动物（小鼠、大鼠、仓鼠和兔），则可打乱情期注射PMSG，使其按照预定时间排卵。 ;1）常用的激素 ;;HCG由人早期胚胎的滋养层产生，排卵后8-9天就可自母尿中检出，其作用与延长黄体寿命和维持妊娠有关。 目前多用于实验动物的另一种激素是人绝经促性腺激素（human menopausal gonadotropin, hMG），是从绝经妇女尿中提取的，主要表现为FSH活性。该激素分泌的机理是因闭经妇女卵巢内没有成熟卵泡，动情素反馈作用不明显而由脑垂体释放出来的。 ;2）常见动物的常用超排方案;（3）家兔 每天皮下注射FSH 1mg，连续注射3天。于最后一次注射FSH之后24小时注射LH 2.5mg。或者，先注射PMSG 50IU，72小时后再注射hCG 50IU。一般于注射LH（hCG）后13小时排卵。 （4）牛 于发情第10-13天开始一次肌肉或皮下注射PMSG 2000-3000IU，或者每天两次肌肉或皮下注射FSH-P（猪脑垂体FSH），连续注射3-4天，总剂量28-50mg。于开始注射促性腺激素后48小时，注射前列腺素F2α或类似物来溶解黄体。母牛一般于注射PG后36-48小时发情。 ;（5）绵羊和山羊 于发情开始后第13（绵羊）或16（山羊）天一次肌肉或皮下注射PMSG 1000-2000 IU，或者每天肌肉注射FSH-P，连续注射4天，总剂量为18-24mg。于开始注射促性腺激素后36-48小时，一次肌肉注射PGF2α或类似物。母羊一般于注射PG后24-36小时发情。发情开始时一次静脉注射hCG 1000单位。 （6）猪 于发情第13、14或15天肌肉注射氯前列烯醇100μg，8小时后再注射同样剂量的氯前列烯醇。在第一次注射氯前列烯醇后24小时，肌肉注射PMSG 750-1000IU。72小时后，肌肉注射500-1000IU hCG。一般于注射hCG后38-50小时排卵。 ;几种动物注射LH（hCG）后的排卵时间 ;3）影响超排效果的因素;三．供体母畜的配种;四．胚胎的回收;（一）回收率;收集胚胎的时间最早也应在发生第一次卵裂之后，这样有利于判断卵子是否受精。 通常是在配种后3-8天，发育到4-或8-细胞期以上为宜。 ;有关动物的排卵时间和胚胎发育速