微生物工程学.docVIP

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微生物工程学

第二章 1.发酵工业对微生物菌种的要求。(选择菌种应遵循的原则) 答:(1)培养基廉价,生物繁殖快,代谢产物的产量高。 (2)在易于控制的条件下迅速生长和繁殖,发酵周期短。 (3)单产高的营养缺陷型突变株或调节突变株或野生菌株。 (4)选育抗噬菌体强的菌株。 (5)菌种性能稳定,不易变异退化。 (6)不产生任何有毒的生物活性物质和毒素。 2.菌种保藏原理和方法。 答:原理:根据菌种的生理生化特性人为地创造条件,使微生物处于代谢不活泼,生长繁殖受到抑制的休眠状态,以减少菌种的变异为原则。 (1)挑选优良菌种,最好是休眠体。 (2)创造一个最有利于休眠的环境条件。 方法:(1)斜面低温保藏法(4~5℃冰箱中) (2)液体石蜡保藏法。 (3)沙土管保藏法。 (4)冷冻干燥保藏法。 3.常用的物理化学诱变剂。 物理诱变因子:紫外线、x射线,B射线,r射线,激光 化学诱变因子:亚硝基月瓜,硫酸二乙酯DES,Y啶类物质 4.发酵培养基的选择原则。 答:(1)原料价格低廉,质量稳定,取材容易。 (2)能提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。 (3)有利于减少培养基原料的单耗。 (4)尽量减少副产物的形成,便于产物的分离纯化。 第三章 1.原核生物与真核生物的调节部位。 答:原核生物:溶质吸收、酶活力、酶或诱导合成 真核生物:溶质吸收、酶活力、核内转录、细胞质中的转译、化合物被摄取和脱离细胞器 2.什么是次级代谢产物并举例。 答:由微生物产生的,与其生长和繁殖无关的一类物质,也称次生代谢物, 常见的次级代谢物有抗生素、毒素、色素等。 3.初次级代谢物的调节机理及方式。 答:初级:避开固有的反馈调节(1)中间产物的积累(2)终产物的积累 细胞膜通透性的调节 次级:诱导调节, 反馈调节, 碳氮分解物的调节, 磷酸盐的调节, 细胞膜透性的调节 4.如何使野生型的菌积累某些代谢产物。 答: 第四章 1.不同发酵方式的特点。(三点) 答:(1)分批发酵 特点:菌体整个生长过程分为延迟期,对数期,减速期,稳定期。 (2)补料分批发酵 特点:可除去速效碳源的阻遏效应; 避免培养基积累有毒代谢物; 不需要严格的无菌条件; 菌种不易老化和变异。 (3)连续发酵 特点:能维持低基质浓度; 可提高设备利用率和单位时间的产量便于自动化控制; 长时间的连续培养难于保证纯种培养菌种易发生变异退化。 2.各工艺条件对发酵的影响及控制。 答:温度:(影响) 影响酶活性; 影响反应速率; 影响生物合成途径。 (控制)采用二级或多级管理折中法 PH:(影响)对微生物生长和产物合成的影响; 对产物合成的影响。 (控制)在基础培养基配方中考虑维持PH的需要; 通过中间补料来控制PH值。 溶解氧:(影响) CO2:CO2浓度增加——微生物生长受到抑制——基质的异化,ATP的生成受到抑制——产物合成受到影响 基质浓度:(影响)对微生物生长的影响; 对产物形成的影响 (控制)采用中间补料 3.什么叫呼吸商。 呼吸商为CO2释放率与耗氧速率之比。 4.中间补料的作用。 答:解除基质过浓的抑制 解除葡萄糖分解阻遏效应 解除产物的反馈抑制 5.泡沫的消除方法,机理有什么不同,各有什么特点。 答:1.机械消泡法 原理:依靠机械力引起的强烈振动或压力变化促进泡沫破裂 特点:不引进外界物质,较少污染机会,但不能从根本上消除引起稳定泡沫的因素 2.化学消泡法 原理:降低液膜的机械强度及表面张力 特点:消泡彻底,但给下游工程带来困难 第五章 1.发酵液的预处理有哪些? (1)粘度的改变(加水稀释,加热)(2)调节PH(3)絮凝(4)加入助滤剂(5)加入反应剂 2.细胞破碎的方法。 机械法:珠磨法 压榨法(固体剪切作用) 高压匀浆法 超声波法(液体剪切作用) 非机械法:干燥处理:空气干燥 真空干燥 冷冻干燥 溶胞作用:化学法 物理法 酶法 3.盐析的原理,cohn方程 ,影响盐析的主要因素。 原理:高浓度的中性盐能促使蛋白质等发生沉淀或絮凝现象。蛋白质的溶解度与盐浓度之间的关系可用cohn方程表示。 logS/S0=-ks·I S:离子强度为I时的蛋白质的溶解度(g/l) S0:纯溶剂(即I=0)时,蛋白质的溶解度(g/l) Ks:盐析常数与温度和PH无关 I:离子强度,等于1/2 Mi:离子i的摩尔浓度 Zi:所带电荷 影响因素:(1)蛋白质的初始浓度 (2)离子强度和种类的影响 (3)温度对盐析的影响 (4)PH对盐析的影响 4.溶剂萃取分配定律 单级,多级理论得律。 在一定温度和压力下达成平衡时: K=溶质在萃取相中的浓度/溶质在萃余相中的浓度 单级萃取: 多级错流萃取: 多级逆流萃取: 第六章 1.什么叫灭菌度? 每处理1000罐中只允许一个活菌。即染菌几率为1/1000

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