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* mRNA的剪接过程:二次转酯反应 * * 根据基因的类型和剪接的方式,通常把内含子分为4类: I :主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的 rRNA基因; II:也发现于线粒体、叶绿体,转录产物是mRNA; III:是常见的形成套索结构后剪接,大多数mRNA基因有此类内含子; IV:是tRNA基因及其初级转录产物中的内含子,剪接过程需酶及ATP。 * 5. 前体mRNA分子有剪切和剪接两种模式 前体mRNA分子的加工除上述剪接外,还有一种剪切(cleavage)模式。 剪切指的是剪去某些内含子后,在上游的外显子3?-端直接进行多聚腺苷酸化,不进行相邻外显子之间的连接反应。 剪接是指剪切后又将相邻的外显子片段连接起来,然后进行多聚腺苷酸化。 * 6. 前体mRNA分子可发生可变剪接 许多前体mRNA分子经过加工只产生一种成熟的mRNA,翻译成相应的一种多肽;有些则可剪切或(和)剪接加工成结构有所不同的mRNA,这一现象称为可变剪接(alternative splicing),又称选择性剪接。 * 真核细胞基因的前体mRNA交替加工的两种机制 * 大鼠降钙素基因转录本的可变剪接 * 有些基因的蛋白质产物的氨基酸序列与基因的初级转录物序列并不完全对应,mRNA上的一些序列在转录后发生了改变,称为RNA编辑(RNA editing)。 RNA编辑作用说明,基因的编码序列经过转录后加工,是可有多用途分化的,因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 (四)mRNA编辑是对基因的编码序列进行转录后加工 * APOB基因的mRNA在肝和肠黏膜编码不同多肽链 * 四、RNA催化一些真核和原核基因内含子的自剪接 1982年美国科学家T. Cech和他的同事发现四膜虫(tetrahymena thermophilic)编码rRNA前体的DNA序列含有间隔内含子序列,并且在没有任何来自四膜虫的蛋白质情况下,rRNA前体能准确地剪接去除内含子。这种由RNA分子催化自身内含子剪接的反应称为自剪接(self-splicing)。 * * 根据基因的类型和剪接的方式,通常把内含子分为4类: I :主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的 rRNA基因; II:也发现于线粒体、叶绿体,转录产物是细胞器mRNA; III:是常见的形成套索结构后剪接,大多数mRNA基因有此类内含子; IV:是tRNA基因及其初级转录产物中的内含子,剪接过程需酶及ATP。 * I和II型内含子的剪切与III型内含子剪接的比较 rRNA 细胞器mRNA A * I型内含子以游离的鸟嘌呤核苷或鸟嘌呤核苷酸作为辅因子完成剪接。鸟嘌呤核苷或鸟嘌呤核苷酸的3′-OH与内含子的5′-磷酸共同参与转酯反应。这种转酯反应与前体mRNA内含子剪接的转酯反应类似,不过参与反应的不是分支点A的2?-OH,切除的内含子是线状,而不是“套索”状。 某些线粒体和叶绿体的mRNA前体还有另一类自身剪接的内含子,称为II型内含子。这类内含子的剪接与前面介绍的前体mRNA内含子剪接相同,但是没有剪接体参与。 I,II型内含子自身剪接能力以RNA保守的二级构型保证。 * (rRNA) (细胞器mRNA) * * 四膜虫rRNA内含子的二级结构 四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 5′-端核苷酸序列 * 二、真核rRNA前体经过剪接形成不同类别的rRNA 转录 45S - rRNA 剪切 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S * 真核前体rRNA转录后的剪切 * 三、真核生物前体tRNA的加工包括核苷酸的碱基修饰 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA * RNaseP、D内切酶 * tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP * * * 碱基修饰 (2)还原反应 如:U ? DHU (3)核苷内的转位反应 如:U ? ψ (4)脱氨反应 如:A ? I 如:A ? Am (1)甲基化 (1) (1) (3) (2) (4) DHU环 反密码子环 TψC环 * * (2)还原反应 如:U ? DHU 尿嘧啶 二氢尿嘧啶 * * (3)核苷内的转位反应 如:U ? ψ(假尿嘧啶核苷) 尿苷 C5 * * (4)脱氨反应 如:A ? I 腺苷酸 次黄嘌呤核苷酸 * 五、RNA在细胞内的降解有多种途径 正常转录物和异常转录物的降解途径有一定差异。 前者包括依赖于脱腺苷酸化的mRNA降解和不依赖于脱腺苷酸化的mRNA 降解; 后者包括无义介导的mRNA 降解、无终止降解、无停滞降解和核糖体延伸介
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