杀鲑气单胞菌的实时定量PCR检测方法的建立和应用 Development and application of real-time PCR assay for detecion of Aeromonas salmonicida.pdfVIP
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杀鲑气单胞菌的实时定量PCR检测方法的建立和应用 Development and application of real-time PCR assay for detecion of Aeromonas salmonicida
第29卷第5期 海洋水产研究 V01.29.No.5
.
20 08年10月 MARlNEFISHERIESRESEARCH Oct.,2008
杀鲑气单胞菌的实时定量PCR检测方法的建立和应用
刘宗晓1 刘 荭2’ 史秀杰2 高隆英2 岳志芹3
吕建强2 何俊强2 江育林2 谢从新
(1华中农业大学水产学院,武汉430070)
(2深圳出入境检验检疫局,518001)
(3山东出入境检验检疫局,青岛266002)
摘要 2.0软件设计引物
选取杀鲑气单胞茵A层A蛋白(VapA)保守序列,利用PrimerExpress
和探针。以ATCC标准株10倍系列稀释,通过血球计数板计数后进行实时定量PCR,制作标准曲
线。通过SDS软件获得细菌数量(X)与Cz值的关系为:Ct=一3.1571(相关系数
4lgX+43.684
R2=0.992)。实时定量PCR的检测限为6个细茵。建立的方法对杀鲑气单胞茵典型株和非典型株
具有较好的特异性,与其他细菌没有交叉反应。杀鲑气单胞茵实时定量PCR方法的建立,对于快速
口岸检疫、临床诊断和疫痛监测具有重要的应用价值。
关键词 杀鲑气单胞菌 实时定量PCRTaqman探针
文献识别码A
中图分类号Q93-332;$945
and ofreal--timePCR
Developmentapplication assay
fordetecionofAeromonassalmonicida
LIU LIU SHI GAO YUE
Zong—xia01Hon92’ Xiu-jie2 Long—yin92Zhi—qin3
LO HE Yu—lin2XIE
JIANG Cong—xinl
Jian—qian92Jun—qian92
(1Fishery of Agricultural
CollegeHuazhong University,430070)
(2Shenzhen andQuarantineBureau,Shenzhen,518001)
EntryExitInspection
(3 andQuarantine
ShandongEntryExitInspection Bureau,Qingdao,266002)
A thedetectionofAeromonassalmonicidabasedon
ABSTRACTmethodwasestablishedfor
real—time chain of anda
quantitivepolymerasereaction(qPCR).ApairprimersTaqmanprobe
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