黄颡鱼黑色素细胞原代培养及迁移相关基因克隆分析 Primary Culturing of Melanoma Cells and Cloning Analysis of Migration-related Gene in Pelteobagrus fulvidraco.pdfVIP

2014年第9卷 生 态 毒 理 学 报 V01．9，2014 第6期，1035．1040 AsianJournalof No．6，1035-1040 Ecotoxicology DOI：10．7524／AJE．1673．5897-2014011700l 程炜轩，许国焕，熊达，等．黄颡鱼黑色素细胞原代培养及迁移相关基因克隆分析[J】生态毒理学报，2014，9(6)：1035—1040 WX，XuG D，et ofmchnomacellsand of in Cheng H，Xionga1．Primaryculturing cloninganalysismigration—relatedgenePelteobagrusfu／v／draco Journalof [J]．Ashn Ecotomcology，2014，9(6)：1035-1040(inChinese) 黄颡鱼黑色素细胞原代培养及迁移相关基因克隆分析 程炜轩1’2’3郎，许国焕1，熊达12，张丽12，吴清洋比，郭莹姿2，谭文俊2 1．广东省微生物研究所，广州510070 2．广东碧德生物科技有限公司，广州510663 3．广东省菌种保藏与应用重点实验室，广州510070 4．广东省微生物应用新技术公共实验室，广州510070 5．广东省部共建华南应用微生物国家重点实验室，广州510070 收稿日期：2014-01．17录用日期：2014-03．14 摘要：黑素皮质素受体一l(MClR)在鱼体中对黑色素细胞的分化及迁移起主要的调控作用，而且在神经系统和免疫系统中均表 现出重要的生理功能。本研究对黄颡鱼表皮黑色素细胞的培养条件进行探索，并在此基础上对MClR基因进行克隆，为后续 研究黄颡鱼黑色素异常的细胞及分子机理研究提供基础。结果表明。黄颡鱼表皮黑色素细胞在27℃培养条件下，72h开始贴 因克隆方面，黄颡鱼MCIR基因全长为936 reticula- bp，编码312个氨基酸，与剑尾鱼(X{phophomsmaculates)、孔雀鱼(Poecilia 瑚、条斑星鲽(Veraspermosen)、海鲈(D缸entrarchuslabrax)、大菱鲆(Psetta 黄颡鱼表皮黑色素细胞原代培养的条件为：27％，添加20％小牛血清，所克隆基因为黄颡鱼MCIR基因。本研究为后续研究 黄颡鱼黑色素异常的细胞及分子机理研究提供基础。 关键词：黑素皮质素受体；原代培养；克隆；黄颡鱼 文章编号：1673—5897(2014)5-1035-06中图分类号：X1715文献标识码：A ofMelanoma of Cellsand PrimaryCulturing CloningAnalysis relatedGeneinPelteobagrusfulvidraco ChengWeimanl23’45，Xu Lil2，Wu Guohuanl2’，XiongDal2，Zhang Qingyan91’2，GuoYingzi2， TanW eniuan‘ of Institute 1．Guangdong 510070，China Microbiology，Guangzhou 2．Bide Co．，Ltd．of 510663，China biotechnologyGuangdong，Guangzhou 3．State of KeyLaboratoryAppfied