黄鳍棘鲷重组IL-1β的表达及生物学活性检测 Expression and bioactivity analysis of Acanthopagrus latus recombinant IL-1β.pdfVIP

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2018-01-29 发布于上海
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黄鳍棘鲷重组IL-1β的表达及生物学活性检测 Expression and bioactivity analysis of Acanthopagrus latus recombinant IL-1β.pdf

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黄鳍棘鲷重组IL-1β的表达及生物学活性检测 Expression and bioactivity analysis of Acanthopagrus latus recombinant IL-1β

第30卷第1期渔业科学进展 V01．30，NO．1 2 o09年2月 PRoGRESSINFISHERYSCIENCES Feb．，2009 黄鳍棘鲷重组IL一1 p的表达及生物学活性检测刘振兴1’2 张殿昌1 李建柱1 江世贵¨ (1中国水产科学研究院南海水产研究所，广州510300) (2华中农业大学水产学院，武汉430070) 摘要将扩增得到的黄鳍棘鲷Acanthopagruslatus白细胞介素1／3(Interleukin113，IL-113)基因克隆到表达载体pQE30，并转化到大肠杆菌M15中进行表达。采用Ni2+-ChelatingSepharoseFF层析对重组蛋白进行纯化，并用梯度透析对纯化蛋白进行复性。经SDS和WesternBlot分析，获得了分子量 Interleukin 为21kD的重组白细胞介素1／3(Recombinant 分离黄鳍棘鲷头肾白细胞，在分离液密度1．080g／ml的界面上可以有效富集白细胞。用不同终浓度的 ng／ml时可以提高IL-1／3基因的转录水平，与5 RT-PCR半定量检测，当培养基中rIL-1／3的浓度达到20 LPS的刺激效果相当，表达的重组蛋白表现出很好的生物学活性。／zg／ml 关键词黄鳍棘鲷 rII。一1G Percoll不连续密度梯度离心细胞培养 RT—PCR 中图分类号 Q344 文献识别码A 文章编号 1000—7075(2009)01-0097—06 and of latusrecombinant Expression Ac口聆fJ}zopng，‘比s IL-1[i bioactivityanalysis LIU ZHANG LI Zhen—xin91，2 Dian—chan91Jian-zhulJIANGShi—guil+ South of (1 ChinaSeaFisheriesResearchInstitute，Chinese 510300) AcademyFisherySciences，Guangzhou (2 430070) HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan ABSTRACT was fromthetotalRNAofAcan— amplified Interleukin一1p(IL一1p)gene PCR wassubclonedinto vector andwassubse— latus．The pQE30 thopagrus product expression transformedintoE．coliM15withIPTGinducementtobe quently