RNA转录PPT.ppt

b、 二级结构中还包括内含子与外显子的某一序列互补所形 成的二级结构 内部引导序列（interal guide sequence IGS）：内 含子中能与两个拼接点边界序列配对的一 段序列 # 第一类内含子的拼接依赖于以上二级结构 －－为自我拼接的进行提供活性位点 2、 拼接机制（以四膜虫的大rRNA前体的拼接为例） （1） 两种rRNA转录在一条35S的产物中，26SrRNA 有内元 5’ U G 3’ 小rRNA 大rRNA（26S 有内元） （2） 35SRNA体外有自我拼接的能力 反应需要：一价和二价离子 鸟苷酸辅助因子（GTP GDP GMP和 鸟嘌呤核苷） 不需能量的供给 （3） 拼接反应后，G与内含子（414base） 5’端以磷酸二 酯键相连 （放射性标记试验） （4） 具体的拼接过程 第一步： 游离G发动的转酯反应 G 的 3’-OH 攻击内含子的 5’拼接点 G- 含子元、左外显子元（有游离3’OH） 第二步： 游离外显子（左）发动的转酯反应 左外显子的3’-OH 攻击3’拼接点，同时释放 线状的内含子,形成成熟RNA分子 ? 两次转酯反应是紧密偶联的 ? 释放出的内含子可继续进行转酯反应 而形成环状 （5） 自我拼接过程主要由转酯反应构成，且完全由内含子自身 完成--------自我拼接的最大特点 ? 转酯反应是………. ? 内含子自身能形成特定的二级结构，产生适于拼接反 应的构象和活性位点,在G的参与下完成拼接反应 (内部引导序列) 这一机制如下图所示 : 科罗拉多大学Cech等人完成（美） 活性位点 3、内含子的催化功能 35SRNA前体拼接释放的内含子（414base）进行的自身转 酯反应 （1）线状分子自身环化能力及环化后的逆环化 A 16 （线性片段） U20 (线性片段) 逆环化 逆环化 （2） C—15: 逆环化 将UUU加到 5’端的能力 表明: 该环形产物具有连接两个RNA分子的能力 （3） L—19： 具有酶活性 即Cech等人证明的 L—19 的 polyC 聚合酶活性 L—19 分子 由内含子核心进行的寡聚C的聚合 L—19 分子 内含子 （4）总结： a、 四膜虫的 35SRNA 的内含子有自身催化的性质 即 --- 将一处已有的磷酸二酯键转变成另一处新的磷 酸二酯键，不需要额外的能量 因此： 内含子可以看作是 RNA重排酶（RNA rearrangease） 或 RNA异构酶（RNA isomerase） 其中：