2005年自然基金申请书从中药活性成分吸收阐明炮制的机理.doc

摘要： 研究假说：中药经炮制后可提高活性成分的吸收，从而达到增加药效的目的。 本研究选择淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai.），利用ADME/Tox平台研究单体活性成分Epimedin A、Epimedin B、Epimedin C、Icariin 、Baohuside Ⅰ的吸收、代谢机理与动力学及淫羊藿炮制品的标准提取物中这5个主要活性成分的吸收与代谢及其相互作用。从中药活性成分吸收与代谢的角度阐明淫羊藿的炮制机理。 中药炮制的科学研究起步较晚，对减毒或增效的物质基础及炮制机理研究较少。目前对中药炮制机理的阐述只是停留在该过程的两端即化学成分的变化和药理药效层面，而对阐明炮制机理的重要环节——炮制前后有效成分的吸收、代谢研究不够深入，本课题拟从更深层次上阐明中药炮制机理，同时为制定合理的炮制工艺和质量标准提高科学依据，为中药现代化、国际化做出更大贡献。 (一)立项依据与研究内容（4000-8000字） 1.项目的立项依据 1.1中药炮制是我国人民在数千年的医疗实践中不断总结、改进、发展形成的一套传统制药技术，和中药复方一起构成了祖国医药学的两大鲜明特色。 目前对中药炮制机理研究所采用的方法有：①应用化学方法进行研究[1]：中药的疗效，是由于其所含的化学成分决定的。中药经过炮制后，所含的化学成分的性质和含量会产生不同程度的改变，因而药理作用、临床疗效也会发生相应变化，可见，研究中药炮制前后化学成分性质和含量的变化是中药炮制机理研究的重要内容，该方法在一定程度上能阐明炮制原理，而且能指导炮制工艺的设计和改进，也是制订质量标准的重要依据。蔡宝昌等[2，3]测定了马钱子不同炮制品中生物碱和马钱子苷的含量，表明炮制后生物碱和马钱子苷的含量均降低；蔡宝昌等[4]从炮制前后的马钱子中提取鉴定了16个生物碱，其中异马钱子碱等为新生物碱；②应用实验药理学方法进行研究[1]：中药的临床研究由于受到复方用药和患者对象的制约，一般不易进行，加上很多中药化学成分研究还缺乏与药效的紧密联系，或者尚属空白，因此实验药理学的研究也是揭示中药炮制机理的方法之一。应用实验药理学的方法研究中药炮制，主要选用适合中医病理模型的方法和指标来进行，或选用已有的药理方法和指标来进行。在化学成分不清的情况下，通过实验药理学的方法来研究炮制前后的生物活性变化，也可达到控制炮制质量和指导工艺改革的目的。如：蔡宝昌等[2]的研究表明马钱子不同炮制品的急性毒性较生品均有所降低；马聘等[5]的研究表明草乌用新方法炮制后具有对心律影响小、毒性低等优点。 总之，目前中药炮制机理研究主要通过炮制前后药物有效成分含量或溶出量增加、与治疗无关的成分的减少和药材中所含酶的活力的破坏以保留有效成分等化学成分变化的角度和炮制前后药理毒理的对比等角度来阐述。 1.2从目前对中药炮制机理的研究现状可看出：对炮制机理阐述的过程中缺少一架沟通中药炮制前后化学成分变化与药理药效变化之间关系的桥梁——中药活性成分ADME/Tox系统的研究；中药活性成分吸收与代谢是中药产生生物效应的重要环节，更是彻底阐述中药炮制机理的最佳切入点。本研究拟利用中药活性成分细胞层次的ADME/Tox系统研究中药淫羊藿的入药品种之一淫羊藿（Epimedium koreanum Nakai.）的炮制机理。 1.3 为了充分发挥药物的疗效，必须增加有效成分在体内的溶出度、释放度和吸收率，以提高生物利用度。然而药物在体内药效的发挥很大程度上取决于血药浓度的高低，而药物在生物体内的吸收、代谢与血药浓度的高低有密切关系。目前，口服给药在各种给药途径中占有主导地位，因此，药物的ADME/Tox系统研究是生物药剂学研究的重点之一，ADME/Tox 系统区别于以前的吸收、分布、代谢、排泄的串级研究不同在于：①提取与筛选同时进行，可以全面检测和预见药物提取过程中成分及在体内吸收、分布、代谢、排泄和毒性各方面的问题；②用细胞（特别是人源细胞）进行，采用高通量技术[6]。国外对药物ADME/Tox系统（吸收、分布、代谢、排泄、毒理、药物－药物之间相互作用）方面的研究非常重视，从而多种研究药物肠道吸收的生物学方法应运而生。ADME/Tox系统研究中最著名的吸收模型——Caco-2模型被美国FDA认为是预测人体药物吸收的行之有效的方法，Caco-2模型辅以大鼠在体肠灌流模型可以从在体和细胞两方面全面阐述药物的ADME过程及其变化。 (1)Caco-2细胞模型[7] Caco-2细胞来源于人体结肠腺癌细胞。由于Caco-2细胞在培养条件下可自发进行上皮样分化并可形成紧密联结,其形态学、标志酶的功能表达及渗透特征与小肠类似, Caco-2细胞模型可作为研究小肠表皮细胞药物转运和代谢的体外模型。其优点为:省时、可测定药物的细胞摄取及跨膜转运