LRRC4基因转染U251细胞的比较蛋白质组学分析英文文献.pdfVIP

ISSN 1007．7626 中国生物化学与分子生物学报 2009年 4月 CN 11-3870／Q ChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiol 25(4)：345～351 LRRC4基 因转染 U251细胞的比较蛋 白质组学分析 杨 静， 武明花 ， 王 蓉， 张祖萍，李小玲，李桂源 (中南大学肿瘤研 究所，长沙 410078) 摘要 LRRC4是我室 自主克隆的一个脑组织优势表达基因．前期研究结果表 明，外源性 LRRC4基 因转染至 U251细胞 ，可 明显地抑制 U251细胞 的增殖、黏 附、趋化和侵袭等生物 学行为．因此， LRRC4亦是一个脑胶质瘤抑制性基 因．为了进一步 了解 LRRC4在胶质瘤发生发展 中的调控作用， 本研究采用荧光差异凝胶电泳 (2D—DIGE)和质谱分析技术获得 了LRRC4转染 U251细胞的 11个差 异表达蛋白质，并用 Westem 印迹证实了U251细胞在转染LRRC4基 因前后热休克蛋 白27、stathmin 1和 S100钙结合蛋 白A11的差异表达变化 ．这些差异蛋 白质涉及细胞代谢、增殖、转录、信号转导 等众多事件 ，表明LRRC4基 因转染 U251细胞后可能通过调控这些蛋白质的表达而参与细胞 的增 殖、黏 附、趋化和侵袭等生物学过程 ． 关键词 LRRC4；胶质瘤 ；荧光差异凝胶 电泳；MALDI．TOF／TOF．MS，MS 中图分类号 R73—3；R739；R730．5 ComparativeProteomicsAnalysisofDifferentiallyExpressedProteins inU251CellsTransfectedbypcDNA3．1(+)orLRRC4Gene YANGJing，WU Ming—Hua ，WANG Rong，ZHANG Zu-Ping，LIXiao—Ling，LIGui-Yuan (CancerResearchInstitute，CentralSouthUniversity，Changsha 410078，China) Abstract 艘 C4 isadominantlyexpressed gene involved inneuraldevelopmentandaxon growth in the brain，and itsexpression isalsoassociatedwithgliomaprogression．Asthegliomaclinicalgradingincreases， the expression of RRC4 gradually decreases，oreven diminished． C4 transfection can inhibitthe proliferation，adhesion，chemotactic response and invasion in U25l cells，therefore，referred asa tumor suppressivegeneinglioma．In thisstudy，weuseddifferentialin—gelelectrophoresis(DIGE)andmass spectrometry(MS)toanalyzetheproteinsinU251cellstransfectedbypcDNA3．1(+)or RC4，and discovered1ldifferentiallyexpressedproteins，includingheatshockprotein27，stathminand S100calcium bindingproteinAllthatwerevalidatedbyW estern blot．11l1esedifferentiallyexpressedproteinswereinvolved in