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电针通过FPR受体抑制IL-1β作用改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力研究生：卢奕帆导师：施静教授摘要目的：电针对中风病人症状改善作用非常明显，因此日益受到医疗工作者的重视，但其作用机制和作用途径仍在探索中。本研究拟以抗炎性分子Annexin1的受体FPR为关键干预点，观察电针对脑缺血/再灌注大鼠空间学习记忆能力的影响以及缺血灶半影区IL-1β表达、释放的影响，探讨电针改善脑缺血/再灌注大鼠的作用机制。方法：健康成年雄性SD 大鼠，随机分为对照组（Control）、脑缺血再灌注组（MCAO/R）、电针组（MCAO/R+EA）和侧脑室给药组（MCAO/R+EA+Boc-1）。电针选择大鼠人中、承浆两穴；侧脑室注射Boc-1以拮抗FPR受体作用；水迷宫实验检测大鼠寻找平台潜伏期、寻找平台速度、寻找平台时间、寻找平台路程。PCR和WesternBlot技术检测皮层缺血灶半影区炎性因子IL-1β的mRNA水平和蛋白表达水平。结果：1.电针人中、承浆穴可以改善脑缺血大鼠空间记忆能力；脑室注射FPR受体拮抗剂Boc-1翻转电针作用：通过大鼠寻找平台的潜伏期、游泳距离、游泳速度、游泳时间这四个方面的检测发现：与对照组（Control 组）相比，脑缺血组（MCAO/R组）大鼠寻找平台潜伏期长、游泳距离长、游泳速度慢、游泳时间长，且均有显著性差异（P0.05）；与脑缺血组相比，电针组（MCAO/R+EA 组）大鼠寻找平台潜伏期短、游泳距离短、游泳速度快、游泳时间短，且均有显著性差异（P0.05）；与电针组相比，侧脑室给药组（MCAO/R+EA+Boc-1组）大鼠寻找平台潜伏期长、游泳距离长、游泳速度慢、游泳时间长，且均有显著性差异；在游泳距离和游泳时间上，对照组与电针组存在显著性差异（P0.05）；脑缺血组与侧脑室给药组相比，以上四项指标没有显著性差异；2.大鼠脑缺血半影区IL-1βmRNA表达水平增加，电针抑制缺血半影区IL-1βmRNA过表达，脑室注射FPR受体拮抗剂Boc-1翻转电针作用：PCR技术检测发现：脑缺血组（MCAO/R组）与对照组（Control组）相比，IL-1βmRNA 的表达显著性增高（P0.05）；脑缺血组与电针组（MCAO/R+EA组）相比，IL-1β mRNA 的表达显著性降低（P0.05）；电针组与侧脑室给药组（MCAO/R+EA+Boc-1组）相比，IL-1βmRNA的表达显著性增多（P0.05）。3.大鼠脑缺血半影区IL-1β蛋白水平降低，对比IL-1βmRNA表达水平增加，提示IL-1β分泌增加；电针抑制缺血半影区IL-1β分泌，脑室注射FPR受体拮抗剂Boc-1翻转电针作用：WesternBlot技术检测大鼠左侧皮层缺血区域周围组织IL-1β（活化的17KD的IL-1β）：脑缺血组（MCAO/R组）与对照组（Control组）相比，IL-1β显著性降低；侧脑室给药组（MCAO/R+EA+Boc-1组）与电针组相比，IL-1β显著性降低；侧脑室给药组与脑缺血组相比，IL-1β显著性降低。结论：电针作用抑制IL-1βmRNA表达、抑制IL-1β分泌，改善脑缺血大鼠空间记忆能力。在Annexin-1作用受体FPR的抑制剂Boc-1的作用下，电针对脑缺血再灌注大鼠IL-1βmRNA抑制作用无效，IL-1β释放抑制作用无效。电针通过FPR 受体，抑制IL-1β合成、释放，改善脑缺血再灌注大鼠空间记忆能力。关键词：脑缺血再灌注；水迷宫；电针；FPR受体；IL-1βAbstractObjectiveEAeffectonstrokepatientsmarkedly,thereforeattractlotsofresearchers’eyesonit,thoughthemechanismofEAisstillintheexploration.ThisstudyisintendedtoexplorethemechanismthatEAworksonMCAO/RratsandtheexpressionofIL-1β infocalischemiapenumbraarea,andtherelationshipwithFPRreceptor.MethodsHealthyadultmaleratsrandomlyassignedasfourgroups:theControl(controlgroup),theMCAO(MCAO/Rgroup),theEA(MCAO/R+EAgroup)andtheBoc-1(MCAO/R+EA+Boc-1group).WechoosetheShuiGouacupointandChengJiangacupointforEA.Boc-1isadministratedforintracerebrovent