人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白非复制型重组腺病毒的构建和表达.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白非复制型重组腺病毒的构建和表达.pdf

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．论著．人呼吸道合胞病毒融合糖蛋白非复制型重组腺病毒的构建和表达袁媛，何金生，付远辉，张梅，唐倩，李栋梁，魏薇，屈建国，洪涛【摘要】目的构建含有A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Virus，RSV)融合 RespiratorySyncytial 糖蛋白(Fusion adenovirusvector， glycoprotein，F)基因的非复制型第一代重组腺病毒(Fimtgeneration FGAd)，并研究F基因在重组腺病毒中的表达。方法利用限制性内切酶XhoI和Hindm从质粒进行同源重组，鉴定正确后，用脂质体法转染293细胞，WesternBlot鉴定目的基因表达。结果获得了表达RSVF基因的非复制型重组腺病毒FGAd／F，WesternBlot检测到F基因的表达。结论获得一株可表达A亚型BSVF的非复制型重组腺病毒FGAd／F，可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用。【主题词】重组腺病毒；呼吸道合胞病毒；融合糖蛋白 and deficientrecombinantadenovirusF of Constructionidentificationof encodinggenesubgroup replication Ahuman virusYUANYuan。，HE Yuan-hui．ZHANGMei，TANG syncyti习d Jin-sheng，，U Qian， respiratory 12 Medical Dong-liang，WE!Wei，Q￡，Jian-guo，HONGTao．。Departmentofimmamdogy，AnhuiUnivers时，Hefei 230032．China author：HE CorrespondingJin-sheng，E-mail：jshhe@蛳u．edu．饥 adenvirusfusion Astrainof deficientrecombinant 【Abstract】Objective replication encodingglycoprotein Ahuman constructedandthe ofFWRgidentified． (F)of virus(RSV)W88 subgroup respiratorysyncytial expression with intoadenovirnseshuttle MethodsTheF wasobtainedfrom XhoI andHindⅢ，cloned gene pGEM3zf-F vector thenthe Was咖nsfjmedintoE．coli with pShutth—CMV．andresultingpShuttle·CMV／F BJ5183／ppAdeasy- Was 1to F recombination．711liBresultant line