乙肝病毒的非规范复制循环及其产物特点.pdfVIP

乙肝病毒的非规范复制循环及其产物特点 李涛综述，任万华‘审校 (山东大学附属省立医院肝病中心，山东济南250021) 【中田分类号】R512．6+2【文献标识码】B 【文章组号11001—5256(2008)05—0394—03 乙肝病毒非规范复制产生的双链线性DNA确的测定，所以无法对非规范复制产生的具体机制 (DSLDNA)具有活跃的非同源重组能力，是病毒 DNA整合人宿主细胞基因组的优先前体，促进了病 病毒的这种非规范复制产生的机制和正链引物无法 毒DNA整合和宿主细胞癌变；同时还可以合成 正常转位的原因进行了研究。他们设计了DR序列 cccDNA或包装成成熟病毒颗粒感染新的肝细胞，形内和序列附近两类点突变株，并将其转染到LMH原 成一个独立稳定的循环而存在于感染细胞内。本文 代肝细胞，培养结果显示上述点突变均没有影响病 将就乙肝病毒非规范复制产生的机制、复制中间体 毒负链的合成和病毒DNA的合成的总体水平，但是 的结构特点和生物学特征作一综述。 除仅有DR2序列内突变的突变株和野生型病毒产 1 乙肝病毒非常规复制循环和产生的机制 物一致外，其他两类突变株感染肝细胞后的复制产 HBV侵人细胞脱去核壳，借助病毒和宿主细胞 物中DSLDNA比例均明显增加，有的甚至检测不到 各种酶的作用，病毒DNA经过缺口修补、折叠、扭曲 rcDNA的存在。其中DRI序列内点突变的突变株 而形成稳定存在于宿主细胞核内的超螺旋共价闭合 其复制的产物中线性DNA所占比例最高。在对复 环状DNA(cccDNA)，后者作为病毒复制的模版，转制产物DSLDNA的3’末端序列测定结果证实了正 录合成病毒前基因组mRNA和病毒蛋白，前基因组链引物确实位于负链的DRl区，而没有转位到DR2 区，同时测序结果还显示这些点突变并没有改变正 mRNA在病毒DNA聚合酶的作用下合成病毒基因 组DNA并和蛋白组装成子代病毒颗粒，释放到宿主 链初始引物序列的核苷酸数目，说明影响引物正常 细胞外感染其他细胞并启动新的病毒DNA的复制 转位的原因并不是引物的裁减不同所致，而是由于 循环，同时基因组DNA还可以返回到核内，补偿细 前基因组mRNA3‘端DRI序列内或序列附近区域 胞核内HBVcccDNA的量。我们称这种复制循环为的突变导致正链引物和负链DR2区的同源性降低， 病毒的“规范复制循环”…。 同时突变又使得两者的空间结构发生了改变，引物 在病毒规范复制过程中，正链引物正确转位到 不能正常转位与DR2区而于原位启动复制，而形成 DR2位置是保证HBVDNA分子形成松弛环状结构 的关键环节旧J。如果在此过程中由于某些原因导 因组中的r区引入几个核苷酸序列，设计成了一种r 致正链RNA引物未能转位到负链DR2而直接自区插入变异的病毒颗粒，染人LMH细胞后，也可以 DRI开始原位引导正链的合成，这就形成了乙肝病 产生双链性DNA。r区序列的变化也参与影响病毒 毒的另外一条复制途径——“非规范复制”【3J。 正链引物的正常转位。在没有发生变异的野生株中 早在上世纪八十年代，有学者【41在研究动物嗜 也可以自发性通过原位延伸形成DSLDNA”】，所占 肝病毒中就注意到了人类和动物的嗜肝DNA病毒 比例约为5％一10％，原因尚不清楚。但考虑到病 中存在这种双链线性DNA分子，他们将其产生归因 毒频繁复制的巨大基数，故此途径产生的双链线性 为在病毒DNA制备过程中由于未达到融解5‘黏合DNA绝对数量并不算少，其结构和生物学特性值得 末端所要求的PH和温度条件所致。限于当时的技 研究。 术水平，无法就这种线性DNA的末端的序列进行精 2乙肝病毒非常规复制中间产物的结构和生物学 特性 收稿日期；2008—02—21修订日期：2008—04—07 非规范复制循环的主要两种中间产物是双链线 作者简介：李涛(198l一)，男。山东淄博人，硬士研究生在读，研究方 向：病毒性肝炎的临床研究。 通讯作者：任万华，伊nbingⅡ