我国D2-43株PrM-E基因的复制型载体质粒DNA的免疫原性研究.pdfVIP

文章编号：1007．8738(2001)05—466。03 我国砚一43株PrM—E基因的复制型载体质粒蹦A的免疫原性研究 陈水平，秦鄂德‘，于曼，胡志君，赵卫，范宝昌，王鹏程，杨佩英 (军事医学科学院微生物流行病学研究所．北京1000711 美麓词：SFV载体；登革病毒；PrME基目；DNA免疫 登革病毒是黄病毒科的重要成员，其基因组为单股正链 33 中圈分类号：R373 文献标识码：A RNA，其单一的读码框架编码3种结构蛋白和7种非结构蛋 白。其中结构蛋白E含有多种B细胞抗原表位和T细胞抗原 擅要：目的通过观察古我国登革2型病毒株(D2—43)的PrM— 表位。结构蛋白PrM是膜蛋白M的前体，除具有抗原功能 E基目的复制型SFV重组质粒DNA的免疫原性，为登革新型疫苗 区外，还有助于E蛋白的正确折叠及其稳定。而且，PrM和E 的研制提供依据。方法将PrM—E基因自T载体上切下，插^复制 双基因的联台表达可形成病毒样颗粒…，该病毒颗粒有助于 型SFV病毒载体质粒DNA中。将此重组质粒DNA以电穿孔法导人 BHK2l细胞，表达产物的特异性用间接免疫荧光法进行鉴定。采用 提高宿主的免疫应答水平。因此，PrM和E为登革疫苗研究 去赊内毒素的质粒提取试剂盒制备重组质粒DNA．然后以不同剂量 的重要靶标。 通过肌肉注射途径免疫Balb／c鼠，鼠血清中舶抗体用间接免疫荧 登革病毒的DNA免疫自1997年Kochel首次报道以来， 光法进行检测。结果含PrM—E基因的重组SFV质粒DNA在 这一领域的研究取得了很大进展。登革DNA免疫不但可诱 BHK21细胞中可表达登革2型病毒的特异蛋白；经免疫Balb／c鼠 导中和抗体和细胞免疫反应．而且也有报道．DNA免疫对动 后．鼠血清可与登革D2—43感染的C6／36抗原片起特异的抗原抗 物具有保护作用。当前DNA免疫存在的突出问题是其免疫 体反应。结论含登革2型病毒PrM—E基因的复制型SFV病毒载 体质粒DNA在Balb／C鼠中叮诱导登革2型病毒特异抗体的产生，原性低，因此登革DNA痤苗的研究有赖于采用新型高教的 但抗体水平较低。 基因传递系统。 sFv载体系统是90年代构建成功的新型载体，目前已 onthe of virus#as- Study innmnogenltyreilieafive 经证实含外源基因的重组SFV可诱导小鼠产生体液和细胞 hidDNA PrM-EofChineseD2-43 containinggem 免疫应答。而且对动物具有保护作用。由于甲病毒载体的基 virussh面n 因组RNA可自我复制，因此与常规载体比较，可增强载体 CHEN DNA的免疫原性。目前该载体系统已应用于单纯疱疹病毒等 E—de。，wMan．HUZbi-j1211，ZHAO Shui-p／ng,QIN Wei．FAN