人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建.pdfVIP

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2018-04-07 发布于北京
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人IL-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建.pdf

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上海第二医科大学学报 Vol24No．9 SecondMedical Sep·2004 ·720· AcademicJournal University ot。Shanghai 【文章编号】0258—5898(2004)09—0720—03 ·基础研究· 人IL．10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建陈紫千1，汤耀卿1，张奕1。张轶1。刘新垣2，邹卫国2。张圣道1 (1上海第二医科大学瑞金医院消化外科，上海200025；2中国科学院上海生命科学院细胞生化所) 切下IL．10 PFU／和大鼠胰腺细胞株AR-42J；Westernblot检测人IL-10的表达。结果成功地构建人IL—lO重组腺病毒，病毒滴度达2×109 mL。体外感染的细胞株均检测到IL．10的表达。结论构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导IL—lO的基因表达，为细胞因子的抗炎治疗奠定实验基础。【关键词】腺病毒载体；IL一10；基因表达【中图分类号】R373 【文献标识码】A Constructionof humanIL·-10recombinantadenovirus replication--deficient CHEN Yil，ZHANGYil，LIUXin-yuan2，ZOUWei-gu02， Zi．qianl，TANGYao-qin91，ZHANG ZHANG Sheng-da01 SecondMedical 200025，China； (’DepartmentofDigestiveSurgery，RuijinHospital，Shanghai University，Shanghai 2 Institute andCell Institutes ofBiochemistryBiology，ShanghaiforBiologicalSciences，ChineseAcademyofSciences) Toconstructrecombinantadenovirus humanIL一10 andcheckIL一10 Abstract：0bjective containing gene expres— sioninvitro．MethodsThe humanIL．10cDNAwasremovedfrom andlinkedto full．1ength pcDNA3IL一10 Gateway vector．Thenthe vectorweremixedwiththeadenovirusdesstinationvector．Theadenorvirusvectorcontai． Gateway IL．10cDNAwas therecombinantvirusDNAwaslinearizedREPacIandtransfectedintothe ning produced．Then by 293Acellline．The adenovirus IL-10washarvestedfromthe of293A replication—incompetentcontaining supern