分子细胞生物学-赵艳 第八章 2节真核生物基因控05.ppt

一、基因表达概念 贮存着生物体遗传信息的基因经转录和翻译成蛋白质的过程。 二、基因表达的方式 1、组成性表达 2、诱导和阻遏表达 1、组成性表达（Constitutive expression): 看家基因(housekeeping genes):基因的表达是持续性的，不受调控的。 如：组成机体的结构蛋白；三羧酸循环中的代谢酶等。 四、 原核生物基因表达的调控 研究原核生物的基因表达调控模式可以为探索更复杂的真核细胞基因表达调控机制提供重要的线索，对基因工程也有重要的指导意义。 （一）细菌代谢酶的诱导 （二）操纵子(operon)的结构与功能 （三）乳糖操纵子的工作原理：1.负调控方式 2. 乳糖操纵子正调控方式 乳糖操纵子正调控与葡萄糖效应有关 （四）色氨酸操纵子 1. 阻遏物介导的负调控 2.衰减子介导的负调控 （一）DNA水平 DNA甲基化（DNA methylation）与基因表达阻遏有关 ◆基因组印记（genomic imprinting） 是说明甲基化作用在基因表达中具有 重要意义的最好例证，也是哺乳动物 所特有的现象。 染色质结构与基因表达 2、顺式作用元件与反式作用因子调控基因转录起始 启动子 增强子 沉默子（Silencer) 作用与增强子相反，在基因表达调控中起抑制作用的一种顺式作用元件； 调控作用也不受距离和方向的限制。 （2）反式作用因子 （trans-acting factor） 能直接或间接识别和结合在顺式作用元件上，调控靶基因表达的蛋白质因子，也称为转录因子（transcriptional factor，TF）。 蛋白质-DNA，蛋白质-蛋白质相互作用（interaction）是其发挥功能的基础。 （3）顺式作用元件与反式作用因子的相互作用 基因表达调控是顺式作用元件与反式作用因子相互作用的结果，二者缺一不可。 （3）转录因子上的几种重要结构域—基元（motif） 螺旋-转角-螺旋 b. 锌指（Zinc finger） 某些转录因子的DNA结合区域成指状结构，在其底部有2个Cys和2个His，或4个Cys 与锌离子螯合。 c. 亮氨酸拉链（Leu zipper） 蛋白质之间的相互作用是生命现象的普遍规律之一，在基因表达调控中同样具有重要意义。 亮氨酸拉链是蛋白质二聚体化(蛋白质相互作用的一种方式)的一种结构基础。 某些癌基因(如c-jun，v-jun，c-fos，v-fos等)表达产物通过亮氨酸拉链形成同源或异源二聚体，大大增加对DNA的结合能力，调控基因表达。 在亮氨酸拉链近N-端有富含碱性(带正电荷)氨基酸残基的区域，是DNA的结合区。 二．加工水平的调控 ●选择性拼接是一种广泛存在的RNA加工机制， 通过这种方式，一个基因能编码两个或多个 相关的蛋白质 ◆组成型拼接(constitutive splicing), 一个基因只产生一种成熟的mRNA，一般 也只产生一种蛋白质产物 ◆可调控的选择性拼接产生不同的成熟mRNA， 翻译产生不同的蛋白质,如纤粘蛋白 (fibronectin）的合成 ◆某一特定的外显子是否被包括在成熟mRNA 内，主要取决于它的3’和5’端拼接位点是 否被拼接机器选择为切割位点 五、真核基因的转录后和翻译水平的调节----P428、465 ：任一其他 氨基酸 C：半胱氨酸 H：组氨酸 Cys2 / Cys2锌指 Cys2 / His2锌指 见于甾体激素受体 见于SP1，TF ⅢA等 X N C 锌指 N C 亮氨酸拉链是一个高亮氨酸组成的α螺旋，每两个螺圈出现一个亮氨酸，形成拉链的一边。 两个蛋白质因子的α螺旋通过亮氨酸的疏水作用结合在一起形成拉链结构 亮氨酸拉链 （三）真核基因的转录后水平的调节-------mRNA的加工和剪接 1. hnRNA (heterogeneous nuclear RNA) 不均一核RNA，核内未被剪接的有内含子的mRNA前体。 35/50 成熟的mRNA hnRNA 胰岛素基因 37/50 E