黄瓜细菌性白枯病菌寄主范围与生理生化特性研究.docVIP

黄瓜细菌性白枯病菌寄主范围与生理生化特性研究 　　摘要：黄瓜细菌性白枯病是黄瓜生产上的重要细菌病害，开展该病菌寄主范围和生理生化特性研究，对做好该病防治有重要意义。试验结果表明在人工接种条件下该病菌可侵染黄瓜、茄子、番茄等２４种作物，寄主范围较广；该病菌供试的１０个菌株与绿黄假单胞菌在３６项生理生化指标上反应一致，应同属于一个种。 　　关键词：黄瓜细菌性白枯病；绿黄假单胞菌；寄主范围；生理生化特性 　　中图分类号：Ｓ４３６．４２１．１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11402－0285-03 　　 　　Ｈｏｓｔ Pｌａｎｔｓ ａｎｄ Pｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ Bｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Cｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａ Causing Ｃｕｃｕｍｂｅｒ Bａｃｔｅｒｉａｌ Wｈｉｔｅ Sｐｏｔ 　　 　　ＷＡＮＧ Ｑｉｏｎｇ１，ＬＩＵ Ｃｈａｎｇ－ｙｕａｎ２，ＺＨＡＯ Ｋｕｉ－ｈｕａ２，ＬＩＡＮＧ Ｃｈｕｎ－ｈａｏ２，ＷＡＮＧ Ｈｕｉ２，ＧＵＡＮ Ｔｉａｎ－ｓｈｕ２，ＬＩＵ Ｌｉ１ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｉｓｅａｓｅｓ， ｃｕｃｕｍｂｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｈｉｔｅ ｓｐｏｔ ｗａｓ ｃｏｎｓｉｄｅｒ ｔｏ ｂｒｉｎｇ ｔｈｒｅａｔ ｔｏ ｃｕｃｕｍｂｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ， ｒｅｓｅａｒｃｈes ｏｎ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｒａｎｇｅ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ of the pathogen would be ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｉｓ ｄｉｓｅａｓｅ． The results ｒｅｖｅａｌｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃｏｕｌｄ ｉｎｆｅｃｔ ２４ ｃｒｏｐｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｃｕｃｕｍｂｅｒ，ｅｇｇｐｌａｎｔ and ｔｏｍａｔｏ ｅｃｔ． Ｂａｓｅｄ ｏｎ ３６ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ of the pathogen， ｔｅｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｃｏｎｇｅｎｅｒｉｃ ｗｉｔｈ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ viridiflava． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： cｕｃｕｍｂｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｈｉｔｅ ｓｐｏｔ； Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａ； hｏｓｔ ｐｌａｎｔｓ； ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ 　　 　　由绿黄假单胞菌引起的黄瓜细菌性白枯病［Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａＤｏｗｓｏｎ １９３９］已成为辽宁、山东、黑龙江等省保护地黄瓜生产上危害较为严重的的重要细菌病害，该病主要侵染叶片，病斑圆形或近圆形，中间白色膜质，四周具黄色晕圈，病部没有菌脓。该病发病率一般为１０％～２０％，严重地块达４０％以上。目前国内对该病研究较少，刘长远等［１，２］对该病原菌的分类地位、系统进化及ＰＣＲ检测方法进行了研究，并构建了ＰＣＲ检测体系。国外有些学者对绿黄假单胞菌进行了研究，Ｇｏｕｍａｎｓ［３－８］认为该菌可侵染西瓜、番茄、茄子等寄主植物，明确了从番茄果实上分离的绿黄假单胞菌的生理生化特性；Ｇｏｎｚ??_ｌｅｚ等［5］学者测定了生理生化指标和１６Ｓ ｒＤＮＡ序列。本文对该病菌开展了寄主范围及生理生化特性研究，以期为做好该病害的防治提供依据。 　　１材料与方法 　　１．１病样采集与病原菌分离 　　２００６～２００９年，在辽宁、山东和黑龙江等地采集黄瓜细菌性白枯病病样。切取４ ｍｍ×４ ｍｍ病健交界组织，用７５%酒精浸泡１ ｍｉｎ，３０ ｓ后无菌水冲洗３次，放入灭菌研钵研碎，静置１５ ｍｉｎ，然后用灭菌移植环蘸取上清液，采用平板划线分离法在ＮＡ培养基上进行分离，２８培养２４ ｈ。用灭菌环挑取单菌落，再用平板划线法培养纯化，放入４冰箱中保存备用。 　　对照菌株：绿黄假单胞菌ＰＶ［Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａＤｏｗｓｏｎ １９３９］，由德国ＤＳＭＺ公司提供；黄瓜细菌性角斑病菌ＰＳＬ［Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ ｐｖ． Ｌａｃｈｒｙｍａｎｓ Ｙｏｕｎｇ，Ｄｙｅ ＆ Ｗｉｌｋｉｅ］由中国农业科学院植物保护研究所提供。 　　１．２致病性测定 　　将分离的菌株在ＮＡ平板培养基上生长７２ ｈ，然后用无菌水配成６×１０８ｃｆｕ/ｍＬ菌悬液，分别采用针刺点滴法和无伤点滴法接种黄瓜新鲜叶片，以清水作对