降血压肽的制备及其分析-毕业课题中期汇报精选.ppt

降血压肽的制备及其 导师： 姓名： * 目录 Contents 研究目的与意义 下一步实验安排 研究内容与实验方法 实验进展汇报 1 2 3 4 * 1 绿豆的产量 2 绿豆的加工程度 * 一、研究目的与意义 3 国内外研究进展 * 本课题主要研究以绿豆淀粉加工副产物为原料，采用酶解和色谱技术制备具有降血压功能的 ACE 抑制肽，并对其进行ACE抑制率测定。 天然蛋白水解得到的ACE抑制肽具有显著的降血压活性，长期使用无毒副作用，作为高血压病的新型治疗手段，必将受到人们的欢迎，具有重要的现实意义。因此，绿豆ACE 抑制肽的开发具有广泛的应用前景。 * * 国内外研究现状 * 2、国内外研究现状 2011年，日本开发出一种富含二肽、三肽的低分子绿豆肽口服液。 国外研究现状 国内研究现状 处于研究阶段，对于功能性绿豆肽的结构及产品的开发报道较少 * 二、研究内容与方法 绿豆蛋白水解酶的筛选 1 水解工艺条件的优化 2 降血压肽的分离纯化 3 降血压肽产品的分析 4 静态吸附、动态吸附 5 模拟移动床提取高纯度降血压肽 6 * 绿豆的产量 * 研究方法 绿豆蛋白与活性肽 绿豆副产物 预处理 酶解 脱盐 超滤 静态吸附 模拟移动床 凝胶层析 动态吸附 关键点：酶的筛选、色谱分离高活性绿豆肽 * 1、酶解条件的优化 * 加酶量 pH值 温度 水解时间 底物浓度 酶种类 单因素 正交设计优化酶解条件 * 2、肽的制备及液相分析 * 葡聚糖凝胶层析技术与膜分离技术 通过葡聚糖凝胶与超滤膜分离结合，再经高效液相色谱检测验证，最终得出高活性降血压肽的分子量。 * 3、静态吸附 * 静态吸附试验 树脂的选择 不同pH值水解液 静态吸附试验 不同解析剂静态 解吸试验 * 4、动态吸附 * 确定的技术参数： 动态饱和吸附量 进 料 流 速 水 洗 流 速 醇 洗 流 速 * 5、模拟移动床色谱分离 * 将单柱试验所得的参数在模拟移动床上进行分配，确定模拟移动床的分区情况，各区流速。对产品出口及废液出口进行液相检测，分别分析产品的纯度，及废液出口有无样品流失，以确保纯度及得率。 * 正交试验结果 * 在AS.1398中性蛋白酶水解2h作用下，通过正交试验得到最佳优化组合： pH 7.0，温度50℃，底物浓度5%，加酶量[E]/[S]为1.5:100 加酶量[E]/[S]在ACE抑制率和肽得率的方差分析（Fα=0.05）中有显著的影响。在最佳水解条件下检测肽得率与ACE抑制活性的关系表明，肽得率为58.58%时，水解液的抑制活性最大81.2%。 * 超滤分离降血压肽 * * 凝胶层析色谱分离降血压肽 * * 四、下一步实验安排 * 1.进行静态吸附，动态吸附来确定固定相，流动相，洗脱流速等。 2. 采用模拟移动床分离提取纯度较高的降血压肽 3. 降血压肽产品的分析：采用高效液相色谱对降血压肽产品进行分子量测定，并进行组成成分分析。 * 动画效果 谢谢欣赏 谢谢欣赏 谢谢欣赏 → → → → → → → * * * * *