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分子生物学习题集(2) 为什么λ噬菌体感染产生的溶源菌通常对其他的λ噬菌体的感染有免疫？ --答案：251. 答： 首先感染的λ噬菌体所生成的阻抑蛋白cI会立即与随后感染的噬菌体基因组中的操纵基因结合，阻遏裂解所需的cro和N基因的表达。这样再感染不会产生烈性噬菌体表型。 IS元件： ( ) --类型：选择题 --选择：(a)全是相同的 (b)具有转座酶基因 (c)是旁侧重复序列 (d)引起宿主DNA整合复制 (e)每代每个元件转座1000次 --答案：252．b，d；请预测具有下列突变的λ噬菌体感染细菌的表型，并说明原因： (1)产生一个抗蛋白酶的λcⅡ蛋白的突变。 (2)具有阻止蛋白结合的ΛOR2的突变。 (3)使λ基因失去作用的突变。 (4)编码入cI蛋白的基因突变。 --类型：简答题--答案：253. 答： (1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白的λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)。λ噬菌体感，染过程中，在N蛋白(从PL的左侧表达)使基因表达不在N基因下游终止前，所有的生理功能都是正常的。抗终止导致c又及cro基因下游的表达，从而cⅡ蛋白合成。由于λcⅡ蛋白的突变体具有蛋白酶抗性，它的活性并不依辞于被感染细胞的状态(健康的或病态的)，而且cⅡ蛋白并不维持cⅡ蛋白的整合。由此导致的高浓度cⅡ蛋白有助于从PRE和P1启动子的转录，因此cI蛋白(阻抑蛋白)、cro反义RNA、和整合酶(λ噬菌体整合所需)被合成。阻抑蛋白占据0R和OL操纵基因，通过自调节促进自身的合成(从PRM表达)，从而防止更多的N蛋白和Cro蛋白的合成。 (2)能够阻止蛋白质结合的0R2突变体会导致裂解。0R2搬突变体能够防止Cro蛋白和阻抑蛋白与之结合。cro基因表达不需要诱导物，因此可以高水平表达。 Cro蛋白也能与OR3进行非协同结合，由于有这种结合以及阻抑基因表达需要自身产物的自诱导，因此不能形成阻抑蛋白。Cro最终会关闭所有早期基因的表达,并通过诱导从PQ开始的表达从而诱发中期和后期基因的表达。综上所述；Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。 (3)失活λN基因的突变令导致灭活和降解。N基因的产物是一个抗终止子，是N 和cro基因外的其他基因表达所需的。其结果为大量缺陷的N蛋白和Cro蛋白的合成。因此噬菌体既不能进入溶源状态也不能进入裂解途径，DNA最终被降解。 (4)编码cI蛋白的基因发生突变时会导致快速裂解。产生没有功能的阻抑蛋白不能与0R和OL操纵基因结合，由于没有了竞争，Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。组成转座子的旁侧IS元件可以： ( ) --类型：选择题 --选择：(a)同向 (b)反向 (c)两个都有功能 (d)两个都没有功能 --答案：254.a，b，c；鉴定化合物的致癌性的一个通用实验是爱姆斯试验，通过营养缺陷型菌的回复突变确定其致癌性。用λ噬菌体和E.coli设计一个实验使之能用于致癌物的检测。 --类型：简答题--答案：255. 答： 感染E.coli之后，λ噬菌体通常会进入溶源状态。与操纵基因区域结合的λ阻抑蛋白(cI)通过自调节使噬菌体保持溶源状态。致癌复合物极有可能是诱变剂，既可能是通过在cI基因产生一个无义突变或错义突变影响阻抑蛋白的表达，又可能是通过在操纵基因序列中产生一个突变使阻抑蛋白与PRM/PR启动子的操纵基因(0R1和OR2)结合。通过简易的噬菌斑分析，发现噬菌斑的出现与待测化学物质的诱变性与致癌性有关。 复制转座： ( ) ： --类型：选择题 --选择：(a)复制转座子，即在老位点上留有一个拷贝 (b)移动元件转到一个新的位点，在原位点上不留元件 (c)要求有转座酶 (d)要求解离酶 (e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变 --答案：256.a，c，d； 为什么像流感病毒这样的RNA病毒的生命周期，有力地支持了以下这一论点：与其说病毒是生命有机体，不如说它是“寄生的遗传因子” --类型：简答题--答案：257． 答： RNA病毒的复制依赖于缺失校正活性的RNA复制酶的作用，这样有利于遗传突变。而且，许多RNA病毒的基因组含有多个线性片段。如果两种不同的病毒存在于同一宿主细胞中时，重组会有助于遗传突变。因此RNA病毒的复制不是维持一个“有机物种”的蓝图，而是维持依赖于宿主细胞机制产生后代的遗传因子的感染性。 非复制转座： ( ) --类型：选择题 --选择：(a)复制转座子，即在原位点上留有一个拷贝 (b)移动元件到一个新的位点，在原位点上不留元件 (c)要求有转座酶 (d)要求解离酶 (e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变 --答案：258．b，c，e；一个转座子的准确切离： ( ) --类型：选择题 --选择：（a）切除转座子