生化实验绪论及蛋白质沉淀变性反应稿件教程.pptVIP

生物化学实验;主要内容;;;;;;;;*;*;;;;;;实验内容及安排 ( 72学时 );实验内容及安排（续）;一、实验目的 1、了解蛋白质的一些理化性质，认识蛋白质的 可逆反应和不可逆反应。 2、了解蛋白质的沉淀反应、变性作用和凝固作用的 原理及它们的相互关系。 ; 蛋白质是由氨基酸组成的大分子化合物, 其分子量颇大，介于一万到百万之间，是一种亲水胶体。 蛋白质分子表面的亲水基团（-OH,-COOH,-NH3,以及肽键）等，在水溶液中能与水分子起水化作用（Hydration），使蛋白质分子表面形成一个水化层。每克蛋白质分子能结合0.3-0.5克水。 蛋白质分子表面上的可解离基团，在适当的PH条件下，都带有相同的净电荷，与其周围的反离子构成稳定的双电层。 ; 由于蛋白质溶液具有水化层和双电层两方面的稳定因素，所以胶体系统是相当稳定的。 在一定物理化学因素(如盐析、重金属离子、有机酸、无机酸和加热)影响下,蛋白质颗粒失去电荷，脱水，甚至变性，以固态形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反应。这种反应可分为两种类型： 1、可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构并未发生显著变化，基本保持 原有的性质，沉淀因素除去后，能溶于原来的溶剂中。 2、不可逆沉淀反应：蛋白质分子内部结构、空间构象遭到破坏， 失去原来的天然性质。;蛋白质溶液的沉淀稳定是相对的，有条件的。如果条件发生改变，破坏了蛋白质溶液的稳定性，蛋白质就会从溶液中沉淀出来。;;蛋白质沉淀变性的常见方法; ; 2. 试剂 3%硝酸银，0.5%乙酸铅，10%三氯乙酸溶液，饱和硫酸铵溶液，10%氢氧化钠溶液，浓盐酸，浓硫酸，浓硝酸，5%磺基水杨酸，0.1%硫酸铜，饱和硫酸铜溶液，0.1%乙酸，10%乙酸，饱和氯化钠溶液，硫酸铵粉。 3. 器材 水浴锅,漏斗,滤纸,吸管,试管及试管架,量筒等。 ;四、实验内容;;;;2. 蛋白质的不可逆反应 2.4 加热沉淀蛋白质; 操作步骤 编号;;1、 蛋白质分子中哪些基团分别可以与重金属离子和有机酸作用而使蛋白质沉淀？ 2、 举例说明蛋白质变性和沉淀之间的关系。从原理上说明一个蛋白质沉淀的实用例子。