[医药卫生]色谱柱的使用及保养.pdf

液相色谱实用技术 色谱柱的使用及保养 良好的色谱实验习惯 `拿到一根新色谱柱时，先测柱效 `保留在新色谱柱上测得的色谱图，并记录 条件 `定期检测柱效 `定期检测仪器的谱带展宽 色谱柱的使用及操作 `流动相的转换 .特别是GPC柱 `流速(压力)的变化幅度 `温度的变化幅度 `专用色谱柱∶样品及溶剂的要求 记住∶拿到一根从未用过的色谱柱时 一定要先看其使用说明！ 色谱柱的保养（一） `样品方面 .除去微粒及杂质 .了解样品在流动相中的溶解度 ‡如样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶 解度，防止其在流动相中析出 .了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用 色谱柱的保养（二） `流动相方面 .除去微粒 .纯度的要求 ‡超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低 ‡缓冲液的pH值，在填料的允许范围内 ‡缓冲液（盐）的浓度 ‡溶剂：色谱纯，并与填料相匹配 ‡溶剂中的杂质含量 .流动相对样品的溶解度 ‡有机溶剂或水的比例 在线的保护装置 `给色谱柱提供物理的保护 .除去样品及流动相中的颗粒 `给色谱柱提供化学的保护 .防止分析柱被化学污染 `装置 .在线过滤器 .自装填料保护柱 .预装保护柱 在线过滤器 `In-Line Filter，部件号WAT084560 .防止颗粒在色谱柱头累积 .优点：基本不影响柱效 .在需要高柱效的分析时中常用（如：氨基酸 分析） `可更换的消耗品 .更换滤芯，部件号WAT005139 (5/pkgs) .更换垫圈，部件号WAT084567 (10/pkgs) 保护柱 `可避免化学污染。多数保护柱影响到整个 色谱柱的柱效，特别是在用微柱时 `保护柱的种类 .普通自装填料的保护柱 ‡Waters 的部件号，WAT084550 ，用户自装填料 ‡影响柱效同装填技术有关，柱效降低较大 .Guard-Pak预装保护柱 ‡Waters 的部件号，WAT088141 ‡有各种填料的预装柱供选择，使用方便。填料容 积较小，也引起柱效降低 可换芯式保护柱 新型的保护柱— Sentry Guard `适应的用户类型 .非常脏, 非常复杂的样品本底 ‡生化样品, 溶液 ‡环境样品 ‡食品 .不想作太多的固相萃取 .不想降低柱效 新型的保护柱— Sentry Guard Sentry Guard 的特点 `特点 .高质量, 高效填料- 不损失柱效 .增加分析柱效- 增加适应范围 .20mm柱长- 脏样品载荷能力大，能延长保 护柱寿命 .手可拧紧接头，安装时不需要工具 ‡通用柱套- 适用于所有的HPLC柱(3.9及4.6 内径) ‡整体式（对Waters柱）- 使用方便，容易 .各种不同填料配合Waters柱 Sentry Guard 的规格 `产品描述 .3.920mm柱长 .适应任何色谱柱，不需工具即可安装及更换 .可换柱芯式设计，提供各种填料: ‡BondaPak: