[理学]双水相萃取L-赖氨酸、L-精氨酸阶段小结.ppt

2/28：PEG4000质量分数5、10、15、20、25% ，柠檬酸三钠15%，总量20g 赖氨酸2mL 2g/L，取4mL测 第一周小结 第一周开始实验，由于没有做PEG4000/柠檬酸三钠的相图，所以初步定PEG4000的质量分数从5%~25%，氨基酸浓度配12.5g/L。但发现所测的吸光值上相均特别小，下相有些特别大，超过了0.2~0.8的范围，单从定容后的颜色便可看出太深了；所绘曲线趋势波动很大；且算出来的氨基酸的量明显小于最初滴加的量。故，第二周我们做了相应的改进。 当日小结 根据第一周做了相应的改进，氨基酸浓度为2g/L，取4mL,对于萃取率也分别用计算得来的氨基酸总量与原本滴加的氨基酸总量进行对比，发现依旧存在很大的差别 ；复测了2次，发现三次数据也存在一定的差异。但下相所测的吸光值大部分在0.2~0.8之间，比较有说服力；上相的依旧很小。 当日小结 由于上相吸光值均太小，直接取下相测；计算萃取率时氨基酸总量直接按滴加量算。赖氨酸的曲线，下相的吸光值基本都是0.2~0.8之间，第二次复测效果比较好，从下相浓度曲线与萃取率来看，基本可定柠檬酸三钠wt20%的效果比较可行。精氨酸的曲线，下相吸光值除了第一次复测去2mL，吸光值偏大，其余的吸光值均偏小；但3次测试结果曲线趋势比较稳定，基本可定柠檬酸三钠wt20%的效果比较可行。 PEG4000/磷酸二氢钾体系 当日小结 赖氨酸：复测的曲线比较好，但30%的吸光值有点大，可以考虑取1mL便行。PEG4000wt30%效果比较好。 精氨酸：取2mL下相测，吸光值均在范围内，但两次曲线都不是特别好。 当日小结 赖氨酸：两次的结果均是10%的浓度特别大，导致图线不是特别好。 精氨酸：两次的结果变化不是特别大，基本可定磷酸二氢钾wt20%效果好。 PEG4000/DEX20000体系 当日小结 赖氨酸：6%没有分相。三次曲线差异较大，效果不好。 精氨酸：三次曲线差异较大，效果不好。 当日小结 8%氨基酸均未分相。 两次测试图线均不好。 小结 吸光值范围的控制跟所取的氨基酸的量有关，本身精氨酸的就比赖氨酸小，取的时候因情况而定。 氨基酸总量的计算：根据上下相浓度与体积计算得到的氨基酸总量与滴加量有一定的出入！可能是氨基酸在上下相中没混匀。建议：从分液漏斗分相后的氨基酸放入相应试管后超声振荡后再进行吸取定容测吸光值。 实验中发现每次空白组定容后颜色有出入！可能由两套加热套的差异所引起的，有一个加热效果较好，另一个较差。且，文献有提及过度加热会导致溶液颜色不准甚至的褪色。建议：定容后的容量瓶置于同个水浴锅中设定温度保温15min，减小误差。 赖氨酸用茚三酮法检测。 精氨酸换用坂口试剂检测：甲萘酚+双乙酰法。 3/9:磷酸二氢钾10、15、20、25、30%,PEG4000 20%,总量20g,精赖氨酸2mL 2g/L,取2mL下相测 3/9:磷酸二氢钾10、15、20、25、30%,PEG4000 20%,总量20g,精氨酸2mL 2g/L,取2mL下相测（复测） 3/12:PEG1000 15%,Dex 15%,40℃,总量20g,2g/L赖氨酸1mL,2g/L（阿）精氨酸1mL 当日小结： 效果不是特别好，估计PEG1000存放太久了，故第二天均研究PEG4000. 3/13:PEG4000 10%,Dex 10%,40℃,总量20g,2g/L赖氨酸1mL 3/13:PEG4000 10%,Dex 10%,40℃,总量20g,2g/L赖氨酸1mL（复测） 3/13:PEG4000 10%,Dex 10%,40℃,总量20g,2g/L精氨酸1mL 3/13:PEG4000 10%,Dex 10%,40℃,总量20g,2g/L精氨酸1mL（复测） 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃ 总量20g,2g/L赖氨酸 1mL,取上3mL下2mL 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃ 总量20g,2g/L赖氨酸 1mL,取上3mL下2mL(复测1) 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃ 总量20g,2g/L赖氨酸 1mL,取上3mL下2mL(复测2) 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃,总量20g,2g/L（阿）精氨酸1mL,取上4mL下3mL,J6、J12下、J14下取2mL 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃,总量20g,2g/L（阿）精氨酸1mL(复测1) 3/14:PEG4000 10%,Dex 6、8、10、12、14%,30℃,总量20g,2