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[理化生]2011511植物细胞工程的基本技术
2.1植物细胞工程 2.1.1植物细胞工程的基本技术 一 细胞的全能性 1.什么是细胞的全能性? 2.为什么细胞具有全能性? 3.菊花体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官? 植物组织培养的培养基 定义:含有一定营养成分,供组织培养植物生长的基质 无机营养成分:C,H,O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖(供营养,调渗透压) ③ 琼脂:起支持作用 ④ 激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素 练P98、10(4)书P42拓展视野 PH值:5.0-6.0 避光:利于细胞脱分化产生愈伤组织。 光照:芽发育成叶,叶肉细胞内叶绿素 合成需要光照条件。 1. 在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒,灭菌,并且要求无菌操作? 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 比较 2、有关全能性的表述中,不正确的是( ) A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体,因此全能性最高 B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达 C.卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能 性很高 D.植物细胞离体培养在一定条件下能表现出 全能性 3.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( ) A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 4.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要( ) A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态 C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素 C C C * 专题2 细胞工程 1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆动物-----克隆羊多利诞生于英国. 这样的生物技术属于何种生物工程? 细胞工程 细胞工程 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 利用菊花花瓣培养的菊花 1.为什么植物的一个花瓣就可以培育出完整的植株呢? 4.所有细胞的全能性都一样吗? 一 细胞的全能性 1、概念 :生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整个体的潜能的特性。 2、原因 :生物体的每一个细胞都含本物种的全套遗传信息,都有发育成完整个体的全套基因。 3 、在生物体内,由于基因的选择性表 达,细胞不能表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官。 1)受精卵 生殖细胞 体细胞 > > *4、全能性的比较 2)植物细胞全能性一般比动物细胞强 利用菊花花瓣培养的菊花 植物的花瓣是怎样长成一株完整植株的呢? 二、植物组织培养 关键词: 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织 ①细胞离体②一定的营养物质 ③激素④其他外界条件 1.必要条件: 从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 菊花 花瓣 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程 愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段间以后,通过细胞分裂,形成一种排列疏松无规则,高度液泡化的,薄壁细胞组成的组织。 练P16表 要把一块组织通过培养得到一株完整植株, 应该如何操作呢? 阅读,书P34-35 切取 形成层 无菌接种 诱导愈伤组织的形成 试管苗的形成 培养室 移栽 脱分化 再分化 ?避光 ?光照 ?培养基 书P36小知识 避免杂菌在上面迅速生长而危害培养物的生长。 想一想 2.无菌操作步骤: ①自来水冲洗②酒精球擦手 ③在超净工作台用酒精溶液消毒 ④次氯酸钠溶液处理后用无菌水冲洗 ⑤无菌滤纸处理 杀菌:培养基(皿)接种环、三角锥形瓶。 消毒:材料、操作者双手。 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 2.植物组织培养的过程 (离体的,已分化组织或细胞) (未分化) (分化) 幼芽或幼根? 条件? 优点? 特点? 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 幼苗无毒 保持优良性状 ①适宜温度、光照 pH和无菌环境。 ②无机物、有机物和植物激素(生长素
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