[所有分类]生物化学：第十章 RNA生物合成.pptVIP

DNA dependent DNA polymerase——DDDP DNA dependent RNA polymerase——DDRP RNA dependent RNA polymerase——RDRP RNA dependent DNA polymerase——RDDP 第一节 DNA转录 一、转录的概念 DNA的有义链和反义链 大肠杆菌的RNA聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 大肠杆菌RNA聚合酶各亚基的功能 原核细胞RNA的催化反应 1960年，RNA 聚合酶被发现。在E.coli 中，RNA 聚合酶催化RNA的合成需要： 模板：双链或单链 DNA 活性单体物质：四种NTP 二价金属离子：Mg2+或Mn2+，在生物体中(in vivo）发现的是Mg2+ 合成方向：5’ 3’ RNA聚合酶作用示意图 RNA聚合酶催化的反应 起始位点的识别 转录起始 链的延伸 转录终止 RNA链的延伸图解 大肠杆菌两类终止子的回文结构 RNA合成过程 DNA和RNA合成的比较 真核生物和原核生物转录的差别 第二节 RNA转录后的加工 一 转录产物的加工 rRNA前体的加工 tRNA前体的加工 真核mRNA前体的加工 真核细胞mRNA的加工 二、RNA的拼接、编辑和再编码 RNA编辑的不同类型和分布 三、RNA生物功能的多样性 四、RNA的降解 第三节 RNA复制（噬菌体Qβ和灰质炎病毒） 第四节 核酸合成的抑制剂 一、RNA的加工 二、 RNA的拼接、编辑和再编码 三、RNA生物功能的多样性 四、RNA的降解 在细胞内，由RNA聚合酶合成的原始转录物（primary transcript）往往需要一系列的变化，包括链的裂解、5?和3?末端的切除和特殊结构的形成、核苷的修饰、以及拼接和编辑等过程，才转变为成熟的RNA分子。此过程总称为RNA的成熟或称为RNA的转录后加工。 原核生物的mRNA转录后一般不需要加工，转录的同时即进行翻译（半寿期短）。 rRNA前体的加工 tRNA前体的加工 真核mRNA前体的加工 ?????加工过程： ?a 剪切作用：需核酸酶参与。??? B 甲基化修饰：修饰在碱基上。?? ?C 自我剪接：一种核酶的作用。????????原核rRNA加工：rRNA含非转录的间隔区，其产 物中含tRNA 真核rRNA加工： A.5S自成体系加工少，无修饰和剪接。????B.45S加工中含剪切和甲基化修饰，需核酸酶。 原核生物rRNA转录前体的加工 甲基化 核酸内切酶 核酸外切酶 真核生物rRNA转录前体的加工 核酸外切酶 甲基化 核酸内切酶和外切酶 包括：核酸外切酶从两端向内切去多余序列；在3’-端加CCAOH序列;核苷酸的修饰与异构化；核酸内切酶切除居间序列。 （1）hnRNA被剪接 把内含子（DNA上非编码序列）转录序列剪掉，把外显子（DNA上的编码序列）拼接上，真核生物一般为不连续（断裂）基因（真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因）。 （2）3’端添加polyA “尾巴”； （3）5’端连接“帽子”结构（m7G5?ppp5?NmpNp-）； （4）分子内部的核苷酸甲基化修饰。 因发现断裂基因而获1993年诺贝尔生理学奖的Richard J Roberts and Phllip A Sharp 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子(cistron ) m7G-5′ppp-N-3 ′ p AAAAAAA-OH ? 5′端接上一个“帽子”(CAP)结构 ? 3′端添加PolyA“尾巴”,由RNA末端核苷酸转移酶催化 ? 剪接：剪去内含子(intron)，拼接外显子(extron) 大多数的真核基因都是断裂基因，断裂基因的转录产物产物需要通过拼接，去除插入部分（即内含子，intron），使编码区（即外显子，Extron）成为连续序列，这是基因表达的一个重要环节。 RNA编码序列的改变称为编辑（ editing）， RNA编码和读码方式的改变称为再编码（recoding）。由于存在选择性的拼接、编辑和再编码，一个基因可以产生多种蛋白质。 编辑类型 机制 存在 U的插入与删除 gRNA的转酯反应 锥虫线粒体mRNA C、A或U的插入