油菜花粉粒萌发的荧光观察本科毕业论文课件演示.pptVIP

* 油菜花粉粒萌发的荧光观察 学生：施晓丽 指导教师：龚莉 1 . 引言 油菜是十字花科植物,开花传粉后,落在柱头上的花粉粒经识别,亲和的则吸收柱头上的水分和分泌物开始萌发,内壁从萌发孔突出,继续伸长,形成花粉管。为观察花粉粒的萌发,现在植物学实验多数是采集花粉粒,在含有蔗糖、硼酸、琼脂的培养基上培养几十分钟,使其萌发,然后制片置于显微镜下观察。此方法不能显示其在花柱上的实际萌发情况。花粉粒在柱头上萌发及在花柱中伸长的真实情况,一般采用石蜡切片观察,这种方法费时、费工,效果不好。而利用荧光染料及荧光显微镜可弥补上面两种方法的不足,操作简单,效果显著。 2. 材料与方法 2.1材料: 安庆师范学院生命科系植物园中种植的垦C1和7H321号油菜植株及其花粉 。 2.2方法 2.2.1人工授粉取样 2009年3月19日上午8：00—9：00，选取还未散粉的花蕾先进行去雄套袋，将取下的花粉置于培养皿中保存。于当日上午9：00—10:00对雌蕊柱头进行人工授粉。授粉后2，4，6，8，24小时分别采摘4朵花，取雌蕊放入卡诺氏固定液中固定4小时以上（固定液冰乙酸：无水乙醇=1：3），然后置于70%乙醇中保存，待用。 2. 材料与方法 2.2.2花粉粒萌发的观察方法 采用荧光显微镜法观察花粉粒的萌发。具体流程如下：取去保存的雌蕊，用蒸馏水冲洗干净，置于载玻片上，在载玻片上将油菜花柱用刀片纵切成薄片,用吖啶橙染液染色10分钟，然后盖上盖玻片，均匀用力压片，在荧光显微镜下观察并拍照。 3.结果与讨论 3.1 花粉和柱头的形态特征 甘蓝型油菜花粉粒赤道面观近圆形或长圆形，极面为三裂圆形，花粉具三个萌发沟，沟上覆盖有颗粒状物。甘蓝型油菜柱头主要由众多的乳突组成，乳突呈长圆柱形，顶端钝圆。 图1 油菜花粉粒萌发的荧光观察异花授粉 2小时 20 *10 花粉粒和乳突细胞 图2 油菜花粉粒萌发的荧光观察异花授粉 2小时 40*10 萌发中的花粉粒 图2 油菜花粉粒萌发的荧光观察异花授粉 2小时 40*10 萌发中的花粉粒 图4 油菜花粉粒萌发的荧光观察自花授粉 4小时 20*10 图5 油菜花粉粒萌发的荧光观察异花授粉 乳突细胞 2小时 40*10 图6 油菜花粉粒萌发的荧光观察自花授粉 4小时 20*10 图7 油菜花粉粒萌发的荧光观察自花授粉 4小时 20*10 3.结果与讨论 3.2 自花授粉的花粉在柱头上的萌发 授粉4小时种内杂交的组合，其花粉已大量萌发，在8小时以后花粉管开始伸长，24小时后全部萌发。 3.3 异花授粉的花粉在柱头上的萌发 在种间杂交组合中，授粉2小时以后，柱头上的花粉已有部分开始萌发，花粉粒的三个萌发孔清晰可见，8小时以后花粉管开始伸长，24小时后全部萌发。