[生物学]研究生基因表达调控熊.pptVIP

1、帽子结构 RNA 剪接 选择性剪接 意义之二 RNA的编辑是对mRNA前体的序列进行的改编。 在mRNA 前体分子的碱基序列中： 删去C、插入U：C被U取代； 删去G、插入A：A被G取代。 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 第四节 原核生物基因表达的调控?  3.乳糖操纵子的正调控 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 (1) 辅阻遏蛋白对trp操纵子表达的调控 辅阻遏蛋白（trpR的产物）通过与操纵基因的结合与否来控制结构基因是否被转录。 (2) 辅阻遏蛋白的活性控制 辅阻遏蛋白的活性受到色氨酸水平的控制，色氨酸与辅阻遏蛋白结合则激活了辅阻遏蛋白，这样辅阻遏蛋白就可与操纵区DNA结合，关闭trp操纵子的表达。 反义RNA技术及作用原理 反义RNA技术： 利用基因重组技术，构建人工表达载体，使其离体或体内表达反义RNA，从而抑制靶基因的表达 。 作用原理: （1）复制水平：与引物RNA互补结合，抑制DNA复制。 （2）转录水平：①与mRNA 5′末端互补结合，阻止帽子结构形成；②作用于外显子和内含子连接区，阻止前mRNA的剪接； ③作用于poly A形成位点，阻止mRNA的成熟及其向胞浆中的转运. （3）翻译水平：可能是最主要方面，①互补于起始位点阻止核糖体结合；②互补于编码区阻止核糖体在mRNA上移动；③降解靶mRNA 产生的核酸堆积物 严紧反应产生两种非正常的核酸堆积物 [有时又称预警子(alarmone)]，即ppGpp和pppGpp，统称(P)PPGPP。 (p)ppGpp的产生机制 严紧因子RelA是一种(p)ppGpp合成酶，约与5%的核糖体结合在一起。 当A位被空载tRNA占据时， RelA被激活。 一个空载tRNA进入A位就生成一个(p)ppGpp (p)ppGpp的作用 严紧反应使得rRNA和tRNA的合成量大幅减少（10-20%），一些mRNA的合成也减少（1/3）。蛋白质的降解速率增加，许多代谢调节作用开始发生。 DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶（DNMTs）的作用下，将一个甲基添加在DNA分子的碱基上，最常见的是加在胞嘧啶上，形成5-甲基胞嘧啶（5mC)。5mC占胞嘧啶总量的2%-7%，约70%的5mC存在于CpG二连核苷。 结构基因含有很多CpG 结构，基因组中60%～ 90% 的CpG 都被甲基化, 未甲基化的CpG 成簇地组成CpG 岛, 位于结构基因启动子的核心序列和转录起始点。 （2）DNA甲基化的功能 第一步（起始阶段）是较长dsRNA在ATP参与下被RNaseⅢ样的特异核酸酶切割加工成21-23nt的由正义和反义链组成的小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）。 第二步（效应阶段）是siRNA 在ATP参与下被RNA解旋酶解旋成单链，并由其中反义链指 导形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex，RISC)。 miRNA具有高度保守性： 即各种miRNA都能在其他种系中找到同源体； miRNA执行一定的生物学功能： 对与其互补的mRNA表达水平具有调节作用； 一些偏大的miRNA可能参与了基因组的重组装（27nt）； Pre-miRNA Pre-miRNA 是由内源性基因间区或内含子的DNA反向重复序列转录而来,它是一种长约70nt的非编码RNA, 具有茎-环结构也即发夹状结构。 Pre-miRNA在Dicer的作用下可被剪切成miRNA miRNA 只是pre-miRNA 茎中的一个臂 miRNA与靶mRNA的作用模式： 1）二者不完全互补，即二者不完全时配对结合时，主要影响翻译过程而对mRNA的稳定性无任何影响。如线虫的lin-4 2）二者完全互补，即二者完全配对结合后，类似siRNA与靶mRNA的结合，特异性的切割mRNA。如miR39/miR171 3）上述两种模式均具备。当其与靶mRNA完全互补配对时，直接靶向切割mRNA，而不完全互补配对时起调节基因翻译的作用。如let-7 果蝇/线虫 miRNA与siRNA的区别： miRNA与siRNA的联系： 均为Dicer的产物：长度均为22nt左右 5＇端是磷酸基 3＇端是羟基 均需Argonaute家族蛋白的存在 同为RISC的组分 二者进化关系上可能的两种推