[高等教育]工艺02 第二章 微生物工业菌种.pptVIP

第二章 生物工业菌种与种子的扩大培养 第一节 工业微生物菌种 一、工业生产对菌种的要求 二、工业常用微生物菌种 第二节 工业微生物菌种的选育 一、自然选育 二、诱变育种 第三节 工业微生物菌种的衰退、复壮与保藏 第一节 工业微生物菌种 一、工业生产对菌种的要求 1、能够利用廉价原料，简单培养基，大量高效地合成产物。 2、遗传性能要相对稳定，不易退化 3、不易感染杂菌和噬菌体 4、产生菌及其产物无毒（非致病菌） 5、生产特性要符合工艺要求，生产条件易于控制 二、工业常用微生物菌种 （一）细菌（Bacteria） 1.醋杆菌属（Acetobacter） 醋酸单胞菌（Acetomonas） 醋酸杆菌（Acetobacter） 醋酸 2.乳酸菌（lactobacter iaceae） 乳酸杆菌属（lactobacillus） 乳酸链球菌属（Streptococcus） 乳制品，L-乳酸 3.芽孢杆菌（Bacillus） 枯草芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 蛋白酶，淀粉酶 4.梭状芽孢杆菌 丙酮丁醇，丁二醇等 5、谷氨酸棒杆菌 谷氨酸和其他氨基酸 6、产氨短杆菌 氨基酸 核苷酸 7、运动发酵单胞菌 乙醇 8、古细菌 极端酶的开发 （二）酵母菌（yeast） 1、酵母属酵母（Saccaromyces） （1）啤酒酵母 A 上面酵母 B 下面酵母 （2）酿酒酵母 （3）葡萄酒酵母 （4）面包酵母 2、毕赤酵母（Pichia） 甲醇酵母（Pichia pastorous） 树干毕赤酵母（Pichia stipitis） 生产蛋白质，饮料酒类的污染菌 ３、假丝酵母（Candida） 产朊假丝酵母（Candida utilis ）生产饲料，含蛋白质高 热带假丝酵母（Candida tropicalis）生产石油蛋白 解脂假丝酵母（Candida lipolytica）石油脱蜡，制蛋白质 （三）霉菌 1、毛霉属（Mucor） 高山被孢霉 花生四烯酸 多种具有羟化能力 2、根霉属 米根霉：淀粉酶，L-乳酸 华根霉：我国酒药/酒曲中，淀粉酶 3、曲霉属（Aspergillus） 黑曲霉（A.niger）：淀粉酶，糖化酶，蛋白酶 果胶酶等，酶制剂工业应用广泛 米曲霉（A.oryzae）：酿酒糖化曲，酱油发酵 4、青霉属（ Penicillium） 产生柠檬酸、延胡索酸、草酸、葡萄糖酸等有机酸；利用产黄青霉系选育出来的某些菌系制造青霉素等。 （四）放线菌（actinomyces） 链霉菌属 小单孢菌属 （五）其他 ——担子菌 灵芝、灰树花、多糖、抗癌药物 ——藻类 螺旋藻 蛋白 蓝绿藻，光合自养 某些担子菌的子实体 第一节 工业微生物菌种 一、工业生产对菌种的要求 二、工业常用微生物菌种 第二节 工业微生物菌种的选育 一、自然选育 二、诱变育种 第三节 工业微生物菌种的衰退、复壮与保藏 第一节 工业微生物菌种 一、工业生产对菌种的要求 二、工业常用微生物菌种 第二节 工业微生物菌种的选育 一、自然选育 二、诱变育种 第三节 工业微生物菌种的衰退、复壮与保藏 二、诱变育种 按照生产的要求，根据生物的遗传和变异的理论，用人工的方法造成菌种变异，再经过筛选、而达到菌种诱变选育的目的。 诱变育种一般采用物理、化学诱变剂使微生物DNA的碱基排列发生变化，以使排列错误的DNA模板形成异常的遗转信息，造成某些蛋白结构变异，而使细胞功能发生改变。 1、出发菌株（parent strain）的选择应考虑的问题 2、菌悬液的制备 （1）、选择合适的介质：用生理盐水或缓冲液制备。 （2）、使细胞或孢子处于良好的分散状态。方法：先用玻璃珠振荡分散，然后再用脱脂棉或滤纸（或双层擦镜纸）过滤，以达到单细胞状态。 （3）、调节适当的细胞或孢子密度。 真菌孢子或酵母悬浮液：106个/mL 放线菌孢子或细菌悬浮液：108个/mL 方法：血球计数板，平板菌落计数法，光密度等。 诱变剂剂量：剂量偏低，正突变出现较多。致死率一般90~99.%，或75~80%，或更低。 诱变处理方式：紫外线与光照复活的交替处理；复合处理；同一诱变剂连续重复处理。 4、变异菌株的分离和筛选 理性化筛选：运用遗传学、生物化学的原理，根据产物己知的或可能的生物合成途径、代谢调控机制和产物分子结构来进行设计和采用一些筛选方法，以打破微生物原有的代谢调控机制，获得大量形成产物的高产突变株。 ? 高通量筛选 突变高产基因的表现 形态突变 高产突变 耐药性突变 营养缺陷型突变 结构类似物抗性突变 诱变育种的几个概念