[医学]1动物细胞与组织培养_细胞工程.ppt

动植物细胞区别？？ 紧密连接存在于脊椎动物的上皮细胞间（图11-1），长度约50-400nm，相邻细胞之间的质膜紧密结合，没有缝隙 间壁连接是存在于无脊椎动物上皮细胞的紧密连接，连接蛋白呈梯子状排列，形状非常规则，连接的细胞内骨架成分为肌动蛋白纤维。 粘合带呈带状环绕细胞，一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方。在粘合带处相邻细胞的间隙约15～20nm。 桥粒存在于承受强拉力的组织中，如皮肤、口腔、食管等处的复层鳞状上皮细胞之间和心肌中 存在于可兴奋细胞间的一种连接方式，其作用是通过释放神经递质来传导兴奋。由突触前膜(presynaptic?membrane)、突触后膜(postsynaptic?membrane)和突触间隙(synaptic?cleft)三部分组成?突触前神经元的突起末梢膨大呈球形，称突触小体 * 清洁，无污染 单细胞比群落细胞更难培养 合适的培养基和溶液　 * 保证无微生物污染 * 玻璃器皿也要用重蒸水反复冲洗。 * 过滤器：过滤除菌：大多数培养用液，如人工合成培养基、血清、酶液等均采用滤过法除菌 * 根据实验要求准备好已消毒的所需用品，清点无误后放在超净工作台内。 * 无菌环境中操作时,首先要点燃酒精灯。所有操作均应在近火焰处进行， 操作　　动作应准确敏捷，不应太快，以防空气流动增加污染机会。不能用手触机及器皿的消毒部分。 几个到几十个微米，最大的细胞是鸵鸟卵，直径150mm。最长的细胞是神经细胞，神经纤维长度可大于1m 紧密连接：细胞间结合牢固，无间隙。 又称封闭小带（zonula occludens），存在于脊椎动物的上皮细胞间（图11-1），长度约50-400nm，相邻细胞之间的质膜紧密结合，没有缝隙。在电镜下可以看到连接区域具有蛋白质形成的焊接线网络，焊接线也称嵴线（图11-2，3），封闭了细胞与细胞之间的空隙。上皮细胞层对小分子的透性与嵴线的数量有关，有些紧密连接甚至连水分子都不能透过。 是存在于无脊椎动物上皮细胞的紧密连接，连接蛋白呈梯子状排列，形状非常规则，连接的细胞内骨架成分为肌动蛋白纤维。在果蝇中一种叫做discs-large的蛋白参与形成间壁连接，突变品种不仅不能形成间壁连接，还产生瘤突。 粘合带（adhesion?belt）呈带状环绕细胞，一般位于上皮细胞顶侧面的紧密连接下方。在粘合带处相邻细胞的间隙约15～20nm。 桥粒（desmosome）存在于承受强拉力的组织中，如皮肤、口腔、食管等处的复层鳞状上皮细胞之间和心肌中。相邻细胞间形成纽扣状结构， 化学突触（synapse）是存在于可兴奋细胞间的一种连接方式，其作用是通过释放神经递质来传导兴奋。由突触前膜(presynaptic?membrane)、突触后膜(postsynaptic?membrane)和突触间隙(synaptic?cleft)三部分组成?突触前神经元的突起末梢膨大呈球形，称突触小体(synaptic?knob)。 是正常骨髓中的一种能生成血小板的成熟细胞 ， 有无限生长、转化和转移三大特点，也因此难以消灭。 消除微量重金属导致的酶催化反应中的抑制作用 水纯化装置　　细胞培养对水的质量要求较高。一般需要使用重蒸或三蒸水配置各种培养用液。 * 过滤装置 各种培养用液只能用过滤的方法进行除菌消毒处理。微化滤膜滤器是目前应用最广泛的过滤装置。 * 细胞冷冻贮存器 　　细胞冷冻贮存具有经济、省力和较好保持细胞生物学特性的优点，目前各实验室主要使用液氮容器贮存细胞。 * 培养器皿　　　 培养器皿包括各种规格的玻璃、塑料培养瓶，培养皿，吸管，离心管等。 * 洗刷消毒间： 烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。 分析间： 显微镜、计算机及打印机等。　　 * * 无菌操作的要领 　　由于体外培养的细胞缺乏机体抗感染功能，所以在一切操作中要努力作到最大限度的无菌，防止污染。 超净工作台消毒　　打开紫外线杀菌灯照射消毒20～30分钟，然后关闭紫外灯，打开风机，流入的空气是经过除菌板过滤的空气，工作台可保持无菌环境。 洗手　 操作时因整个前臂伸入工作台内，所以洗手一定要刷洗到肘部，然后用0.2%新洁尔灭或75%的酒精棉球擦拭。? * 火焰消毒 所使用物品均应经过烧灼，所用瓶口等开启或封盖时均需迅速旋转过火焰进行消毒。 注意金属器械不能在火焰上烧灼时间过长。 烧过的用具均要待冷却后再接触组织细胞。　 吸取营养液后的吸管不能再经火焰烧灼,否则会烧焦形成炭膜,再用时会将有害物质带入培养液。　　 * 合理布局　 右手使用方便的用品放右侧，左手使用方便的用品放左侧。　 　 酒精灯置于中央，打开的培养液、培养瓶等应保持斜立或平放（瓶口长时间开口直立,易增加落菌机