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[理学]第五章发酵工程的灭菌
第五章 发酵工程的灭菌与空气净化 操作过程: 空罐准备:清洗、检修和检测。 升温:把培养基加热到灭菌所需的温度。 保温维持:在灭菌温度下保持灭菌所需时间。 冷却保压:把培养基的温度降低到接种的温度。 三路进汽:直接蒸汽从通风、取样和出料口进入罐内直接加热,直到所规定的温度,并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进气”。 3. 空气过滤除菌介质 (1)纤维状或颗粒状过滤介质 棉花:常用,有弹性,纤维长度适中。 玻璃纤维:直径小,不易折断,过滤效果好。 活性炭:要求质地坚硬,颗粒均匀。 缺点:体积大,装填费时费力,松紧度不易掌握,空气压降大。 发酵生产中制备无菌空气的大致过程 高空取气管 为远离地面几十米的管子。 每升高10米,空气中杂菌降低一个数量级。因此从高空取气要比从低空取气有利得多。 高效前置过滤除菌流程 空气净化的流程 吸气口吸入的空气先经过压缩前的过滤 进入空气压缩机(120?150°C) 冷却(20?25°C),除去油、水,再加热至30 ?35°C。 最后通过总过滤器和分过滤器,获得洁净度、压力、温度和流量都符合要求的无菌空气。 第三节 空气除菌(净化) 发酵对空气无菌程度的要求 一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过,即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3。 空气中微生物(包括细菌、酵母、霉菌和病毒) 含量一般为103 ~ 104个/米3。一般附着在空气中的灰尘上或雾滴上。 灰尘粒子的平均大小约0.6μm左右,空气除菌主要去除空气中的微粒(0.6~1μm)。 一、空气除菌的方法 (一) 辐射杀菌 (二) 热杀菌? (三) 静电除菌 (四) 过滤除菌 二、空气过滤除菌的原理与介质 1.过滤除菌的种类 绝对过滤:过滤介质的滤孔小于细胞和孢子。 如聚乙烯醇缩甲醛树脂(PVF)制成的0.3 ?m的微孔滤膜。 深层介质过滤:介质的孔隙一般大于微生物细胞。 如用棉花、玻璃纤维和颗粒活性炭填充的过滤器。 2.深层介质过滤的原理 微粒随气流通过滤层时,由于滤层纤维的层层阻碍,使气流出现无数次改变运动速度和方向的绕流运动,引起微粒与滤层纤维间产生惯性冲击、拦截、布朗扩散、重力沉降、静电引力等作用把微粒滞留在纤维表面上,实现过滤的目的。 (2)纸类过滤介质——超细玻璃纤维纸 3?6张叠在一起使用,过滤效率高,压降小。 缺点:强度不大(特别是受潮后)。 空气 空压机 贮气罐 冷却 除油水 加热 空气预处理 总过滤器 分过滤器 无菌空气 空气过滤 三、空气的预处理 目的: 提高压缩前空气的洁净度 去除压缩后空气中的油和水 1. 提高压缩前空气的洁净度 (1)提高空气吸气口的位置 (2)在空气入口处设置粗过滤器 ——捕集较大的灰尘颗粒,并保护空压机。 1——高效前置过滤器 2——压缩机 3——贮罐 4——冷却器 5——丝网分离器 6——加热器7——过滤器 2.空气压缩和压缩空气的冷却 (1)空气压缩:克服输送过程中过滤介质的阻力并维持一定的气流速度。 (2)压缩后空气温度显著上升,需冷却。 因为 压缩后的高温空气能引起过滤介质的炭化或燃烧 增大发酵罐的降温负荷 增加培养液水分的蒸发 一般用列管式冷却器进行冷却。 空气贮罐 消除压缩机排出空气量的脉冲,维持稳定的空气压力。 利用重力沉降作用除去部分油雾。 紧接空压机安装。 有些装有冷却管。 3. 压缩空气的除油除水 冷却降温后的空气湿度增大,会使过滤介质受潮失效。 两类设备 旋风分离器——利用离心力进行沉降,对于10?m以上的微粒分离效率较高。 丝网分离器——利用惯性进行拦截,分离效率较高,能除去2~5?m的细小颗粒。 旋风分离器 采用惯性拦截等机理,有效去除空气中的水、油雾、尘埃,不锈钢丝网可清洗,使用寿命长。 4.空气的加热 将除油水的空气加热(温差在10~15°C 左右),降低相对湿度(达50%~60%)后,输入过滤器。 用列管换热器。 空气过滤除菌设备流程 空压机 储罐 二级冷却 加热器 空气过滤 粗过滤 四、空气过滤器 过滤除菌的关键设备 180M3发酵罐车间 大型空气压缩机 发酵车间的空气过滤器 * * * * 第一节 常用的灭菌方法(自学) 第二节 培养基与发酵设备的灭菌(重点) 第三节 空气的除菌(重点) 第二节 培养基与发酵设备的灭菌 最常用的方法:湿热灭菌,效果最好; 培养基灭菌的基本要求:杀死培养基中混杂的微生物,再接入纯菌以达到
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