[理化生]酶 生物化学.ppt

第 三 章 酶 酶的概念 酶又叫生物催化剂，分为两类 酶 、 核酶（脱氧核酶） 第一节酶的分子结构与功能The Molecular Structure and Function of Enzyme  酶的存在形式 单体酶(monomeric enzyme)：仅具有三级结构的酶。 寡聚酶(oligomeric enzyme)：由多个相同或不同亚基以非共价键连接组成的酶。 多酶体系(multienzyme system)：由几种不同功能的酶彼此聚合形成的多酶复合物。 多功能酶(multifunctional enzyme)或串联酶(tandem enzyme)：一些多酶体系在进化过程中由于基因的融合，多种不同催化功能存在于一条多肽链中，这类酶称为多功能酶。 一、酶的分子组成中常含有辅助因子 单纯酶 (simple enzyme) 辅酶中与酶蛋白共价结合的辅酶又称为辅基(prosthetic group)。 体内结合酶的种类很多，而辅助因子的种类却很少。通常一种酶蛋白只能和一种辅助因子结合，成为一种特异性的酶；但一种辅助因子往往能与不同的酶蛋白结合构成许多种特异性的酶。 决定酶的特异性是酶蛋白部分 ，辅助因子决定反应的种类与性质。 二、酶的活性中心是酶分子中执行其 催化功能的部位 酶的活性中心 概念：指必需基团在空间结构上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合并将底物转化为产物。 酶活性中心是酶分子中具有三维结构的区域，或为裂缝，或为凹陷，深入到酶分子内部，常为氨基酸残基的疏水基团组成的。 活性中心内的必需基团 三、 同工酶是催化相同化学反应但一  级结构不同的一组酶 第二节 酶的工作原理 The Mechanism of Enzyme Action 酶与一般催化剂的共同点： 1.在反应前后没有质和量的变化； 2.只能催化热力学允许的化学反应； 3.只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 酶与一般催化剂的不同点： （一）酶促反应具有极高的效率 二、酶通过促进底物形成过渡态 而提高反应速率 加速反应的本质--降低活化能 活化能： 底物分子从初态转变到活化态所需的能量。 能阈： 底物分子从初态转变到活化态所需的最低能量水平。 使反应达到其能阈的两个途径： 为反应物分子提供所需的活化能（外加能量） 降低反应的能阈，使反应沿着一个活化能阈较低的途径进行。 （二）酶-底物复合物的形成有利于底物 转变成过渡态 诱导契合作用使酶与底物密切结合 酶与底物相互接近时，其结构相互诱导、相互变形和相互适应，进而相互结合。这一过程称为酶-底物结合的诱导契合假说 。 邻近效应与定向作用示意图 3. 表面效应使底物分子去溶剂化 酶的活性中心多是酶分子内部的疏水“口袋” 酶反应在此疏水环境中进行，使底物分子脱溶剂化 (desolvation)，排除水分子对酶和底物分子中功能基团的干扰性吸引和排斥，防止水化膜的形成，利于底物与酶分子的密切接触和结合。这种现象称为表面效应(surface effect)。 概念: 研究酶促反应速率以及各种因素对酶促反应速率的影响。 影响因素包括: 酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。 一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速率的影响呈矩形双曲线关系。 单底物、单产物反应 酶促反应速度一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 反应速度取其初速度，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速度 底物浓度远远大于酶浓度 （一）米－曼氏方程式揭示单底物反应 的动力学特性 中间产物 推导过程 稳态：是指ES的生成速度与分解速度相等，即 [ES]恒定。 K1 ([Et]－[ES]) [S]＝K2 [ES] + K3 [ES] 2. Km可以反映酶与底物亲和力的大小。 Km越小，酶与底物的亲和力越大。 3. Km是酶的特征性常数： 与酶的结构，底物和反应环境有关，与酶浓度无关。在一定条件下，某种酶的Km值是恒定的，因而可以通过测定不同酶（特别是一组同工酶）的Km值，来判断是否为不同的酶。 范围：在10-6～10-2 mol/L之间 4. Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。 （三）Ｋm值与Ｖmax值可以通过作图法求取 1. 双倒数作图法(double reciprocal p