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第二章 生化过程参数在线检测技术 2.2 发酵过程主要分析的参数 严格保持菌种的生长繁殖和生物合成所需的最适温度，对稳定发酵过程，缩短周期，提高产量，具有重要意义。 通常可以采用水银温度计、热电阻监测系统中的温度。普遍使用的热电阻有铂电阻和铜电阻。铂电阻精度高、稳定性好、性能可靠；铜电阻超过100℃时易被氧化。 为了使生物反应在适当的温度下进行，必须采取措施——在夹套或蛇管内通入冷却水加以控制。 发酵热的成分 生物热：微生物生长繁殖过程中的产热 搅拌热：机械搅拌造成的摩擦热 蒸发热：被通气和蒸发水分带走的热量 辐射热：发酵罐罐体向外辐射的热量 显 热：空气流动过程夹带着的热量 Q发酵= Q生物+ Q搅拌- Q蒸发-Q显-Q辐射 发酵热的测定 (1)通过测量一定时间内冷却水的流量和冷却水的进出。 Q发酵=GC(T2-T1)/V Q发酵-----------发酵热;C-------冷却水的比热 G-----------冷却水的流量;T1T2------进出口冷却水的温度; V----------发酵液的体积 (2)通过罐温度的自动控制，先使罐温达到恒定， 再关闭自控装置，测量温度随时间上升的速率S。 Q发酵=(M1C1+M2C2)S/V (3)根据化合物的燃烧值计算发酵过程中生物热 的近似值。 (4)测定微生物生长代谢中的耗氧量。 通风（耗氧）发酵过程生成的发酵热数量与过程 所消耗的氧是成正比。 QH=(0.106~0.124)QO2≈(1/10)QO2 QO2------氧的消耗比速(mmolO2/g菌体.h) QH-------发酵热生成的比速(kcal/g菌体.h) 当通风发酵出现溶解氧不足时，有的的微生物能 够进行厌氧反应。则出现: QH(0.106~0.124)QO2 (5) 热力学方法： 根据盖斯定律：“在恒压和恒容条件下，一个反应不论是一步完成或几步完成，其反应热是相同的”。这实际上是热力学第一定律的必然推论，因为焓（H）是状态函数，过程的焓变与途径无关，只决定于过程的始态和终态。发酵热可根据标准燃烧热或标准生成热来计算。 搅拌转速和搅拌功率的测量 搅拌转速：磁感应式，光感应式，测速电机； 搅拌功率：（影响因素：菌丝浓度、黏度、泡沫） 方法：功率表，测定力矩求功率法。 （4） 搅拌功率 指搅拌器搅拌时所消耗的功率，常指每立方米发酵液所消耗的功率（kW/m3）。 它的大小与溶氧传递系数KLa有关。 （5） 空气流量 指单位时间内单位体积发酵液通入空气的体积。 它的大小与氧的传递和其它控制参数有关。 一般控制在0.1~1.0vvm之间 空气流量测定 体积流量型： 会引起流体能量损失，受温度和压力变化的影响； ①同心孔板压差式流量计； ②转子流量计。 质量流量型： 根据流体固有性质（质量、导电性、热传导性能）设计的流量计。 （6） 黏度 粘度大小可作为细胞生长或细胞形态的标志之一。 在发酵过程中通常用表观粘度表示。 粘度的大小可改变氧传递的阻力。 粘度的大小可表示相对菌体浓度。 发酵液粘度测定 毛细管粘度计 回转式粘度计 涡轮旋转粘度计 （7） 料液计量与液位控制 压差法：H=（△P2/△P1）·△H 直接重量测量法：直接称重 体积计量法：计算进出料液 流量计量法：计算流量和时间 液位探针 a）溶解二氧化碳测量 复膜式电极法 渗透膜—碳酸氢钠法 b）发酵尾气的在线分析 CO2分析 氧浓度测量（如质谱分析仪） 引起反应液pH 值下降的主要原因有 1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，特别是葡萄糖过量或者中间补糖过多或溶解氧不足，致使糖等物质氧化不完全，培养液中有机酸会大量积累，从而使pH值下降； 2. 消泡油加得过多； 3. 微生物生理性物质的存在，使pH值下降。 引起反应液 pH值上升的主要原因有： 1.培养基中的碳/氮比例不当，碳源过多，氨基氮释放会使pH值上升。 2.生理碱性物质存在。 3.中间补料液中氨水或尿素等碱性物质的加入过多。 反应液中pH值的控制方法 1.调节培养基中的原始pH值，或加入缓冲溶液制成缓冲能力强、pH值变化不大的培养基。 2. 可在反应过程中加入弱酸或弱碱进行pH值的调节，进而合理地控制发酵条件，也可通过调整通风量来控制pH值。 3. 进行补料，既调节了培养液的pH值，又可补充营养，增加培养液的浓度和减少阻遏作用，进一步提高产率。 4. 酸性铵盐作为氮源时，由于NH4+被利用后