人脐血单个核细胞对半乳糖卵巢早衰小鼠卵巢功能的影响.PDFVIP

424 中国医药生物技术 2015 年10 月第10 卷第5 期 Chin Med Biotechnol, October 2015, Vol. 10, No. 5 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2015.05.008 ·论著· 人脐血单个核细胞 对半乳糖卵巢早衰小鼠卵巢功能的影响 包秀芳，孙萍 【摘要】 疾病的治疗过程中取得了成功[4-6]，尤其是脐血干细 目的 探讨人脐血单个核细胞（HCMNCs ）对半乳糖卵巢早 胞的应用越来越受到重视。本研究将人脐血单个核 衰小鼠动情周期及雌二醇（E2 ）、卵泡刺激素（FSH ）、黄体 细胞（HCMNCs ）直接注射到半乳糖卵巢早衰小鼠 生成激素（LH ）的影响，评价卵巢功能的恢复情况。 受损卵巢内，观察小鼠卵巢功能恢复情况。 方法 将 120 只雌性 SPF 级昆明小鼠随机分为 A （半乳 糖卵巢早衰 + HCMNCs 组）、B （半乳糖卵巢早衰组）、C （空 1 材料与方法 白对照组）三组，每组 40 只。采用给昆明小鼠饲喂 35% 半 1.1 材料 乳糖建立半乳糖卵巢早衰小鼠动物模型，聚蔗糖密度梯度离 1.1.1 试剂 D （+ ）半乳糖购自上海国药集团化 心法制备 HCMNCs 悬液。造模成功后，A 组小鼠双侧卵 学试剂有限公司；聚蔗糖-泛影葡胺分离液为美国 巢内分别注入 10 μl HCMNCs 悬液；B 组小鼠双侧卵巢内 Sigma 公司产品；试剂盒均为美国 Biosource 公司 注入等量 L-DMEM 培养液；C 组未行任何处理。移植后 生产。 50 d，ELISA 法测定昆明小鼠血清雌二醇（E2 ）、卵泡刺激 1.1.2 实验动物 SPF 级昆明小鼠，雌性，8 ~ 素（FSH ）及黄体生成激素（LH ）变化情况。 10 周，体重 20 ~ 25 g ，购于吉林大学动物实验中 结果 HCMNCs 移植前，A 、B 组与 C 组比较，动情周 心。饲养条件为室内温度 21 ~ 24 ℃，湿度为 50% ~ 期紊乱率升高、血清 E2 降低、FSH 及 LH 升高，差异均 60%，自由进水、进食，光照时间为 12 h/d 。 有统计学意义（P 0.05 ）。HCMNCs 移植后，A 组动情周 1.2 方法 期紊乱率下降、血清 E2 升高，FSH 及 LH 降低，与移植 1.2.1 实验分组及建模 将昆明小鼠 120 只随 前比较差异均有统计学意义（P 0.05 ）；A 组与 C 组移植 机分为 A （半乳糖卵巢早衰 + HCMNCs 组）、B （半 后比较，动情周期紊乱率、E2 、FSH 及 LH 无明显差异（P 乳糖卵巢早衰组）、C （空白对照组）三组，每组 0.05 ）；A 、C 组与 B 组移植后比较，动情周期紊乱率、 40 只。A 、B 组小鼠喂食半乳糖食物丸(碳水化合 E2 、FSH 及 LH 有统计学差异（P 0.05 ）。 物 65.5% 、脂肪 5.5% 、蛋白质 21% 、复合维生素 1%、复合矿物质 7% 、另加 35% 半乳糖)；C 组 结论 HCMNCs 能促进半乳糖卵巢早衰小鼠卵巢功能的恢 小鼠喂食不含半乳糖的正常食物丸。各组昆明小鼠 复。 每天行阴道脱落细胞涂片，观察动情周期的变化。 【关键词】 脐血干细胞移植； 卵巢功能试验； 卵巢 饲养 50 d ，A 、B 、C 组随机处死 10 只确定造模 早衰 成功[7] 。本实验研究遵循《实验用动物饲养